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本研究由三部分组成:抗PRRSV中药的筛选、黄芩粗多糖抗PRRSV的研究和抗PRRSV活性跟踪下黄芩粗多糖的分离纯化及黄芩多糖SP2基本化学性质的研究。一.抗PRRSV中药的筛选。
本研究第一次建立了MARC145-PRRSV-样品体系,用于筛选抗PRRSV中药。为提高活性中药筛选的效率,在筛选过程中首次选择了能直观反映细胞状态的指标,即细胞单层的长满程度,作为判断样品的细胞毒性和抗病毒活性的指标。
根据中药的性味、归经及其在临床上的应用,在常用和非常用的中药中进行初步的选择。制备了单方中药及复方中药95%乙醇提取物、水提醇沉物和挥发油样品共116份。
二.黄芩粗多糖抗PRRSV的研究。
(一)黄芩粗多糖的细胞毒性试验。
(二)黄芩粗多糖抗病毒引起的细胞病变作用。
(三)黄芩粗多糖抑制病毒形成空斑试验。
(四)黄芩粗多糖抑制病毒抗原试验。
三.抗PRRSV活性跟踪下黄芩粗多糖的分离纯化和黄芩多糖SP2基本化学性质的研究。
(一)抗PRRSV活性跟踪下黄芩粗多糖的分离纯化。
(二)黄芩多糖SP2基本化学性质的研究UV和IR检测,SP2没有其他类物质的特征吸收峰,HP1100,ShodexKS-804和KS-805串联,测得SP2的纯度为94.2%,HPLC法测得SP2的分子量为16000。制备SP2水解产物和标准单糖的糖腈乙酰酯衍生物,气相色谱测得SP2由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、半乳糖及葡萄糖组成并根据面积比算出各种单糖的比率。