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木聚糖是植物半纤维素的重要组成部分,其主链为木糖基,侧链含有多种不同的取代基,它的完全降解需要多种酶的协同作用来共同完成。其中木聚糖酶水解木聚糖主链骨架的β-1,4-糖苷键,是木聚糖降解酶系中最关键的酶。乙酰木聚糖酯酶可以水解乙酰化木聚糖的O-乙酰取代基团,消除该基团对木聚糖酶水解的空间阻碍作用,增强木聚糖酶对木聚糖的亲和力和降解力。迄今为止,国内外对乙酰木聚糖酯酶的研究鲜见报道。因此,获得具有优良性质的乙酰木聚糖酯酶具有重要的意义。本研究以白色链霉菌为实验材料,通过刚果红染色法验证了该菌具有产木聚糖降解酶的能力。利用生物信息学的方法,对链霉菌来源的碳水化合物酯酶家族已知序列进行比对分析并设计简并引物,通过简并PCR克隆得到一个大小为312bp的乙酰木聚糖酯酶的基因片段。根据得到的基因片段设计特异性引物SPl、SP2、SP3,与已知简并引物AD1、AD2、AD3、AD4进行TAIL-PCR,最终得到长度为949bp(开放阅读框为741bp)的目的基因,编码247个氨基酸。该多肽片段与Streptomyces sp. ACTE(ZP06273846.1)和Streptomyces avermitilis MA-4680(NP822477.1)的乙酰木聚糖酯酶基因序列的相似性较高,分别为78%和58%,并且具有AXE1家族蛋白保守区域；与已知的乙酰木聚糖酯酶蛋白C端区相比,相似性较高,二级和三级结构空间排布特点极为相似；初步判定该多肽片段为白色链霉菌乙酰木聚糖酯酶的C端区域。将编码乙酰木聚糖酯酶的基因以正确阅读框架连接到表达载体pET-28a(+)上,并在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达。经Ni-NTA纯化,SDS-PAGE分析可看到约为26.5kDa大小的单一条带,与理论分子量相近。该酶的等电点为6.0。以4-methylumbelliferyl acetate为底物,测定其反应最初2分钟的吸光值变化,其最适pH和最适温度分别为7.0和65℃,不同金属离子及化学试剂对酶活性的影响的分析表明：Hg2+完全抑制了酶活性,Zn2+和Cu2+分别抑制了酶活性的53.2%和46.9%,Mn2+、Ca2+有轻微的激活作用,Mg2+、Co2+等其它离子和试剂对其酶活的影响不大。