停流技术对溶菌酶与双重响应微凝胶的亲和性变化的动力学控制与活性评估

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在纳米医学中,蛋白质作为治疗药物的应用是一个新兴的研究领域,并且发展迅速。然而,蛋白质容易被体内蛋白水解系统分解、消化并通过肾排泄出去,这在很大程度上限制了它们的使用。尽管生物相容性聚合物可与蛋白质以共价键连接,以保护它们不受免疫系统识别并延长其循环时间,但它们的生物活性有时会降低。为了填补这个空白,可用采用物理隔离,包装或封装技术。到目前为止,已有大量成熟的实例报道,但很少提及客体分子加载和释放的整个时间尺度,特别是初始的快速过程。在此,我们合成一系列具有双重响应的聚(N-异丙基丙烯酰胺-co-甲基丙烯酸)(P(NIPAM-co-MAA))微凝胶。采用适合快速动态检测的停流技术,来研究微凝胶在外界环境刺激下对溶菌酶的吸附和释放的动力学。吸附动力学表明,在初期50 s内,微凝胶第一阶段的塌缩在1 s内,并且溶菌酶的浓度越高,其塌缩过程越迅速。所有的吸附动态曲线可以使用双指数动力学方程进行拟合,并得到两个特征弛豫时间τ1,τ2。利用微凝胶的pH响应性,将溶菌酶从微凝胶中释放,并用溶壁微球菌细胞悬浮液检测溶菌酶的活性,得到相应的特征弛豫时间τ。我们预期这项工作可以为微凝胶作为纳米载体用于蛋白质的传递、控制释放以及化学分离提供基本的动力学数据和理论基础。
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