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乳腺癌是全世界女性发病率最高的恶性肿瘤之一,通常为乳腺上皮细胞发生癌变,对患者及其家属的身心健康产生了严重影响,同时造成社会经济损失。临床上针对乳腺癌的治疗方案,主要为手术治疗,联合使用放疗、化疗等方法。但大多数的单一化疗药物因其靶向性差,毒副作用大,作用时间短等因素大大限制了其临床治疗效果。目的:根据雌激素受体在乳腺癌细胞表面过量表达,且其能与其配体雌酮特异性结合的特性,通过对长效靶向联合药物的脂质体的制备方法的优化,制备出一种装载两种化疗药的长效靶向脂质体制剂,建立了两种化疗药物的含量检测方法,对制剂进行了表征及体外抗肿瘤活性的考察。方法:(1)建立两种化疗药物的含量检测方法:表阿霉素的含量检测使用紫外分光光度法,而紫杉醇的含量检测使用高效液相色谱法,包括标准曲线的绘制,以及对日内、日间精密度进行测量。(2)对两种单独脂质体制剂的制备方法进行了优化,包括磷脂和胆固醇的比例、药脂比、孵药时间、水化时间等,根据两种包载单一化疗药制剂的优化后工艺,确定联合脂质体的制备方法及条件。(3)根据确定好的联合脂质体的制备方法,对不同种脂质体制剂进行了制备,包括四种紫杉醇脂质体L-PTX、SSL-PTX、ES-L-PTX、ES-SSL-PTX,四种表阿霉素脂质体L-EPI、SSL-EPI、ES-L-EPI、ES-SSL-EPI,四种表阿霉素/紫杉醇联合脂质体L-EPI/PTX、SSL-EPI/PTX、ES-L-EPI/PTX、ES-SSL-EPI/PTX,取单独脂质体及联合脂质体的不同种制剂进行表征,包括粒径大小和分布以及Zeta电位值,分别采用低速离心法及透析法检测紫杉醇及表阿霉素的包封率,并对联合脂质体4°C及室温的稳定性和37°C条件下的体外释放情况进行了考察。(4)使用MTT法对表阿霉素不同脂质体制剂及表阿霉素/紫杉醇联合脂质体不同种制剂的MCF-7细胞毒性进行了考察。结果:(1)绘制了两种药物的含量检测标准曲线,且在测定浓度的范围内线性关系良好,日内精密度、日间精密度良好。(2)结合两种单独脂质体的制备方法,以及使用CI指数法对两药联用比例进行了摸索,确定了表阿霉素、紫杉醇联合长效靶向脂质体的制备方案。(3)对紫杉醇脂质体、表阿霉素脂质体及表阿霉素紫杉醇联合脂质体的四种不同制剂分别进行了表征,粒径大小约为120nm左右,粒径均匀,分布均一,PDI值在0.1左右,脂质体均带负电荷。稳定性实验中,ES-SSL-EPI-PTX室温下具有良好的稳定性,且4°C条件下渗漏率更低,体外释放实验结果显示两药的释放行为良好,长效片段在延长药物的释放时间方面作用显著。(4)ES-SSL-EPI-PTX对MCF-7乳腺癌细胞的细胞毒性明显大于L-EPI-PTX,且随着时间延长,毒性逐渐增强。结论:本课题制备出一种能够将两种化疗药同时装载的联合脂质体,并在脂质体表面使用靶向片段加以修饰,不仅充分发挥了两种药物联合应用时的协同作用,靶向递送又能降低制剂对正常组织器官的损害,大大降低了化疗药使用后的毒副作用,同时提高化疗药物对肿瘤的杀伤作用。引入的PEG长效片段,能够使两种化疗药物在体内的作用时间得到延长,从而提升了抗肿瘤效果,降低了药物的毒副作用。上述研究结果为表阿霉素、紫杉醇联合长效靶向脂质体的临床应用提供了重要的实验数据。