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目的：熟悉和掌握体外培养神经干细胞(neural stem cells，NSCs)和雪旺细胞(Schwann Cells，SCs)的方法，为今后NSCs及SCs的研究提供物质基础。观察脑源性神经生长因子(BDNF)和SCs对体外培养的大鼠NSCs分化为神经元的影响。并初步评价BDNF对SCs增殖、分泌的影响。
方法：用含碱性纤维细胞生长因子(bFGF)、表皮生长因子(EGF)及B27的无血清细胞培养技术体外培养新生SD大鼠脑NSCs；取新生SD大鼠双侧臂丛神经，用双酶消化法体外培养SCs；并分别检测特异性标志蛋白nestin和S-100的表达。按培养基中BDNF终浓度的不同将所培养的SCs设立0、10、20、50、100ng/ml组，共5组培养2周，每2天进行MTT法测细胞活力。并对不同浓度BDNF处理的SCs培养24h后，取上清液，ELISA法测细胞分泌神经生长因子(NGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)水平。将培养的NSCs分为4组：空白对照组、BDNF组、SCs组和BDNF+SCs组，4组细胞培养1周后进行神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫细胞化学染色，计数阳性细胞数并进行统计学分析；并对上诉各组细胞培养24h后，取上清液，ELISA法测细胞分泌NGF、FGF水平。
结果：培养出的细胞分别呈Nestin、S-100阳性，为NSCs和SCs。与0ng/mlBDNF组比较，终浓度为50、100ng/ml BDNF组的SCs细胞活力明显高于0ng/ml组(均P<0.05)，而浓度为10、20ng/ml时虽有差异但无统计学意义(均P>0.05)。与空白对照组比较，BDNF组、SCs组和BDNF+SCs组NSCs分化为神经元的数量显著增加(均P<0.05)，其中BDNF+SCs组神经元的数量最高。SCs、NSCs均能分泌NGF和FGF；其中终浓度为50ng/ml BDNF组的SCs分泌NGF和FGF水平最高(P<0.05)；BDNF+NSCs组、SCs+NSCs组和BDNF+SCs+NSCs组分泌NGF、FGF水平高于单独SCs、NSCs组(均P<0.05)，其中BDNF+SCs+NSCs组分泌水平最高。
结论：体外成功分离培养出NSCs及SCs，并可获得大量的纯化细胞；BDNF对SCs的增殖和分泌有促进作用，终浓度为50ng/ml时，SCs的活力与分泌能力最佳；BDNF和SCs均可促进NSCs分化成神经元，在BDNF作用基础上，SCs促进NSCs分化成神经元的数目最多；SCs和NSCs均可分泌NGF和FGF，而将SCs和NSCs共培养其分泌的NGF、FGF水平显著高与单独细胞培养，在BDNF基础上，细胞混合培养更有利于NSCs向神经元方向分化和存活。