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第一部分雌、孕激素对人早孕蜕膜基质细胞中BAFFR表达影响的研究研究背景:妊娠后,蜕膜化的子宫内膜和发育着的滋养层细胞共同构成了母-胎界面。蜕膜基质细胞（decidual stormal cells DSC）是蜕膜组织的主要组成成分,在维持母体界面的免疫耐受发挥重要作用。大量的研究已证实肿瘤坏死因子（TNF）超家族成员参与免疫豁免过程,在胎盘的增殖及分化中发挥重要作用。B淋巴细胞激活因子（B cells-activating factor,BAFF）是TNF超家族的新成员,Phillips TA等发现BAFF表达于母-胎界面处,并证实胎盘滋养细胞层BAFF/BAFFR系统有利于正常妊娠胎盘的自身稳定、生长和重塑。我们在前期的研究中观察到妊娠早期蜕膜组织表达BAFF,推测其可能与早孕期母-胎界面免疫耐受的形成有关。BAFFR是BAFF的特异性受体,关于其在蜕膜组织中表达的研究尚未见相关报道。基于此,本研究拟观察人早孕蜕膜基质细胞（decidual stromal cells,DSC）中BAFFR的表达情况及雌、孕激素对其表达的的影响。研究目的:观察雌、孕激素对体外培养的人早孕蜕膜基质细胞（decidual stromal cells,DSC）中B淋巴细胞刺激因子受体3（B cells-activating factor receptor3,BR3,也称BAFFR）表达的影响,初步探讨其在胚胎植入调控和母胎免疫平衡中的作用,为病理性妊娠的诊疗提供基础实验数据。研究方法:选取正常早孕妇女人工流产蜕膜组织,分离、提纯DSC,培养于含10%去激素胎牛血清培养基内,分为雌二醇（Estradiol,E2）、孕酮（Progesterone,P4）、雌二醇孕酮联合（E2+P4）和空白对照（Control,C）组,培养96h。MTT检测细胞的增殖能力;real-time PCR检测BAFFR mRNA;流式细胞术检测BAFFR蛋白。结果:与空白对照组相比,各实验组DSC增殖能力及BAFFR mRNA水平均无明显变化（P＞0.05）;流式细胞术检测显示BAFFR蛋白定位于DSC胞内,且E2+P4可显著上调其表达（P＜0.05）。结论:正常人早孕DSC表达高水平的BAFFR,雌孕激素联合对其有显著的上调作用,提示BAFFR可能参与胚胎植入的调控及早孕期母-胎界面的免疫调节,对临床各种病理性妊娠如稽留流产,妊娠滋养细胞疾病,妊娠期高血压等的防治具有重要的作用。第二部分雌、孕激素对人早孕蜕膜基质细胞中Bcl-2/Bax表达影响的研究研究背景:细胞凋亡在维持机体正常形态及功能方面起重要作用,胎盘组织中也存在着细胞凋亡。妊娠后,在子宫内膜蜕膜化的过程中,内膜细胞的分化和凋亡对妊娠免疫耐受和限制滋养细胞的过度侵袭具有重要的作用。因此,胎盘细胞凋亡与孕卵着床、胎盘形成和重构关系密切,随妊娠进展,逐渐增加的胎盘细胞凋亡率,可能在胎盘发育和分化过程中发挥重要作用。但是,妊娠后DSC凋亡的具体机制仍不清楚。细胞凋亡受多种基因产物的调控,如细胞因子,白介素和甾体激素等。Bcl-2家族是细胞凋亡的重要调节因子,Bax作为此家族中一员,同Bcl-2作用相反,主要是促进细胞的凋亡;有研究显示Bcl-2/Bax系统有利于胚胎植入过程中局部免疫耐受形成,母体甾体激素可能参与调控胎盘凋亡过程,然而,目前在体外应用雌、孕激素刺激蜕膜组织,探讨其对蜕膜组织凋亡影响的研究较少。研究目的:通过观察雌、孕激素对体外培养的DSC凋亡和Bax/Bcl-2蛋白表达的影响,初步探讨其对早孕期子宫内膜容受性的调控作用,为病理性妊娠的诊疗提供基础实验数据。方法和结果:选取正常早孕妇女人工流产蜕膜组织,分离、提纯DSC,培养于含10%去激素胎牛血清培养基内,分为雌二醇（Estradiol,E2）、孕酮（Progesterone,P4）、雌二醇孕酮联合（E2+P4）和空白对照（Control,C）组,培养96h。MTT检测细胞的增殖能力;流式细胞术检测DSC的凋亡率和Bcl-2/Bax蛋白的表达。结果发现,与对照组相比各实验组DSC增值能力无明显差异（P＞0.05）,而雌孕激素联合刺激DSC后可显著上调其凋亡率和胞内Bax的表达（P＜0.05）,但单一雌或孕激素刺激后DSC凋亡率和Bax表达无显著性变化（P＞0.05）;流式细胞术在各组DSC中均为检测到Bcl-2的表达。结论:本研究结果表明雌孕激素联合刺激DSC可能通过上调其Bax表达来促进自身凋亡,此作用有利于妊娠早期子宫内膜容受性的形成,为各种病理性妊娠的防治和提高体外受精胚胎移植（IVF-ET）着床率等临床应用提供了新的思路与线索。