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目的结直肠癌是一种结直肠上皮性肿瘤,它是可以穿透黏膜层进而浸润到黏膜基层的肿瘤。散发性结直肠癌的发生是一个多阶段的过程,这个过程包含有激活原癌基因,失活APC基因及错配修复基因等等。散发性结直肠癌患者的死亡率明显高于息肉病性结直肠癌患者。在全基因组范围内筛查,确定了s CRC新的候选基因CAPN1。CAPN1是钙蛋白酶家族的一员,钙蛋白酶涉及几种基本的生理过程,包括细胞骨架重塑,细胞信号转导,凋亡和细胞存活。本研究拟通过si RNA对细胞中的CAPN1基因进行沉默,建立细胞模型,进行细胞功能实验以及RNA、蛋白水平相关实验,确定CAPN1的表达与结直肠癌细胞恶性表型的关联,为s CRC的早期预警和靶向治疗提出了新观点。研究方法(1)运用实时定量荧光PCR与蛋白质印迹法检测几种结肠癌细胞系和正常细胞中CAPN1的表达。(2)用si RNA敲低CAPN1的表达,并用定量荧光PCR与蛋白质印迹法验证小RNA的抑制效率。(3)通过体外细胞实验观察CAPN1的缺失对CRC细胞生物学性状的影响。结果经过定量荧光PCR与蛋白质印迹法发现CAPN1在结直肠癌细胞系与正常细胞中均有表达,但结肠癌细胞系中的表达普遍高于正常结肠细胞系,其中HT-29细胞系表达最高,Lo Vo细胞系表达量最低。在敲低CAPN1后,HT-29中CAPN1表达量的降低可以减弱细胞的增殖能力。对细胞的迁移能力也有影响,但对HT-29细胞的影响不如Lo Vo细胞显著。结论通过体外功能实验确定CAPN1基因具有促进CRC细胞增殖、集落形成和迁移的能力,CAPN1很有可能作为癌基因介入到散发性结直肠癌的发生和发展中。