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目的:本课题目的为研究糖皮质激素是否会影响下丘脑GT1-7细胞Kiss-1基因及kisspeptin蛋白的表达,并探寻应激情况下糖皮质激素对下丘脑-垂体-性腺轴功能的影响的可能机制。方法:1.GT1-7细胞的培养及GT1-7细胞形态的观察。2.配制单纯DMEM培养基及含地塞米松浓度分别为0n M、5n M、10n M、50n M、100n M的DMEM培养基,干预GT1-7细胞24小时后收集细胞,通过Realtime PCR法观察不同浓度地塞米松作用下,GT1-7细胞Kiss-1基因的表达情况;通过western blot法检测GT1-7细胞kisspeptin蛋白的表达情况。3.配制地塞米松浓度为0n M、50n M的DMEM细胞培养基干预GT1-7细胞24小时后收集细胞,应用miRNA芯片检测GT1-7细胞miRNA的表达情况。结果:1.地塞米松干预GT1-7细胞后,促进了Kiss-1基因m RNA的表达,差异存在统计学意义。而该促进作用在10n M、50n M、100n M组间两两比较无统计学差异。2.地塞米松干预GT1-7细胞后,kisspeptin蛋白表达发生改变,并且在地塞米松浓度为10n M和50n M时,促进kisspeptin蛋白的表达,差异存在统计学意义。10n M组与50n M组比较无统计学意义。3.地塞米松干预GT1-7细胞后可引起多种miRNA表达量的上调或者下调。值得注意的是,miR-21a-3p和miR-let-7d-3p表达发生了上调;而miR-let-7a-1-3p/miR-let-7c-2-3p表达发生了下调。结论:1.糖皮质激素能够引起下丘脑GT1-7细胞kisspeptin蛋白表达发生改变,因而可能影响HPG轴,进而影响生殖功能。2.糖皮质激素可能通过miR-21/m TOR通路影响GT1-7细胞Kiss-1基因的表达。3.糖皮质激素能够改变下丘脑GT1-7细胞miR-let-7(miR-let-7a-1-3p、miR-let-7c-2-3p/miR-let-7d-3p)的表达量,进而可能参与影响生殖功能。