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目的1.探讨钙视网膜蛋白(calretinin,CR)在诊断先天性肠无神经节细胞症(congenital aganglionosis)即先天性巨结肠(hirschsprung’s disease,HD)中的概率及意义。2.应用免疫组织化学染色方法,观察对比CR、神经元特异性烯醇酶(neuron-specific enolase,NSE)、B细胞淋巴瘤／白血病-2(B-cell lymphoma/leukemia 2,Bcl-2)在HD病变段及正常肠段肠壁表达情况,评价其在诊断HD中的临床价值。方法1.收集我院2008年1月至2014年10月经病理检查苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,H&E)染色确诊为HD病例共495例的病案资料,包括钡剂灌肠(contrast enema,CE)、直肠肛管测压(anorectal manometry, ARM)、经直肠粘膜吸引活检(rectal suction biopsy,RSB)等结果,通过上述各项检查阳性率来比较其在诊断HD中的价值,并分析出现CR阴性结果原因。2.收集我院2011年6月至2013年11月巨结肠术后经H&E染色确诊为HD的手术标本16例,包括HD病变段及近端切缘(即正常肠段),分别对病变段及正常肠段组织切片进行CR. NSE、Bcl-2免疫组织化学染色,计算机成像系统照相存盘,通过图像分析软件(Image-Pro Plus)判定各标志物在HD病变段及正常肠段神经丛中阳性染色面积百分比。结果1.495例HD患儿中,435例术前CE,265例术前ARM,254例CR检查,其中术前经RSB112例,术后142例。CE、ARM及CR诊断阳性率分别为81.1%、90.6%、99.6%,其中CR阳性率术前为98.2%,术后达100%。2.CR在正常肠壁粘膜下及肌间神经丛呈阳性反应,HD病变段粘膜下及肌间神经丛呈阴性表达。NSE、Bcl-2在正常肠壁粘膜下及肌间神经丛呈阳性反应,HD病变段神经节细胞阴性表达,部分神经纤维阳性表达。3.定量分析：CR染色HID病变段与正常肠段神经丛阳性染色面积百分率存在统计学差异。NSE、 Bcl-2染色HD病变段与正常肠段神经丛阳性染色面积百分率无统计学差异。结论1.诊断HD需依靠病史、典型的临床表现及辅助检查,特殊辅助检查中CR阳性率术前为98.2%,术后达100%。2.CR免疫组化染色可显示正常肠壁神经节细胞结构,呈阳性表达,HD病变段呈阴性表达,CR可作为诊断HD一项重要的神经标志物。3.CR可广泛用于临床,作为术前诊断HD的“金标准”。