D-柠檬烯改善大鼠酒精性肝损伤实验的研究

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目的观察D-柠檬烯(D-limonene)对酒精性肝损伤大鼠抗氧化活性及对肝组织核因子κB(NF-κB)、环氧合酶2(Cyclooxygenase-2,COX-2)蛋白表达的影响。方法雄性Wistar大鼠共70只,按体重随机分为7组。A组为空白对照组;B组为酒精模型组,每日给予50%乙醇灌胃,前2周8 m L/(kg?d),后4周递增为12m L/(kg?d),继续灌胃4周;C、D、E组分别为D-柠檬烯低、中、高剂量组,每日分别给予D-柠檬烯100、200、400 mg/kg灌胃;F组为D-柠檬烯单独高剂量组,每日给予D-柠檬烯400mg/kg灌胃;G组为甘利欣对照组,每日给予甘利欣200mg/kg。C、D、E、G组酒精剂量同模型组,F组蒸馏水剂量同空白对照组。每组10只,实验进行6周。末次灌胃禁食12 h后,麻醉,取血,分离血清,留取肝组织。HE染色观察肝脏组织的病理学改变;检测大鼠血浆和肝匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平;免疫组化法检测肝组织中NF-κB、COX-2表达情况,计算其阳性表达率。结果HE染色结果显示,酒精模型组大鼠肝组织呈大泡性脂肪变性,并有大量炎性细胞的浸润;D-柠檬烯各剂量组与酒精模型组相比,脂肪变性呈不同程度减轻,炎性细胞减少。与空白对照组相比,酒精模型组血浆SOD、血浆和肝匀浆GSH-Px活力均降低,血浆和肝匀浆MDA含量明显升高(P<0.05);D-柠檬烯中、高剂量组血浆SOD以及各剂量组血浆和肝匀浆GSH-Px活力均高于酒精模型组,血浆和肝匀浆MDA含量则低于酒精模型组(P<0.05)。酒精模型组与空白对照组相比,NF-κB、COX-2表达明显增多,而D-柠檬烯各剂量组NF-κB、COX-2表达均低于酒精模型组,差异有显著性(P<0.05)。与空白对照组相比,F组大鼠各指标无明显差异(P>0.05)。结论D-柠檬烯能够增强酒精性肝损伤大鼠体内抗氧化酶的活性,减少脂质过氧化物的产生,减少肝组织NF-κB、COX-2蛋白表达,从而改善因酒精暴露引起的肝损伤。
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