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研究背景及目的:糖尿病相关血管并发症是糖尿病患者致残致死的重要因素,而血管内皮损伤及功能障碍是糖尿病血管并发症的早期核心病理机制。在糖尿病血管内皮损伤的复杂机制中,固有免疫系统对血管内皮细胞的调控作用逐渐受到关注,其中,糖尿病诱导固有免疫系统形成“训练免疫”是糖尿病血管并发症机制的创新研究方向。单核细胞分泌是固有免疫系统的重要组成部分。然而,单核细胞分泌的细胞外囊泡（Extracellular vesicles,EVs）在糖尿病背景下对血管内皮细胞的调控机制尚不清楚。因此,本研究拟探索高糖诱导单核细胞经EVs途径调控血管内皮细胞的新机制,以期获糖尿病血管内皮保护的有效靶点。研究方法:第一部分实验分别从生理糖浓度（5.5 mmol/L）及高糖（33 mmol/L）浓度环境下培养的单核细胞（THP-1细胞）培养上清中分离EVs,并经透射电子显微镜、纳米颗粒跟踪分析及蛋白免疫印迹（Western Blotting,WB）鉴定;通过荧光标记检验人脐静脉内皮细胞（Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVECs）对单核细胞 EVs 的摄取,并检验高糖诱导的单核细胞EVs对HUVECs增殖、迁移功能及氧化应激水平的影响,以及对单核细胞EVs对HUVECs中核因子E2相关因子2（Nuclear factor-erythroid 2-related factor 2,Nrf2）及核苷酸结合寡聚化结构域样受体3（Nod-like roll receptor protein 3,NLRP3）信号通路的调控作用。第二部分实验通过生物信息学、RT-qPCR及双荧光素酶报告基因实验的方法预测并筛选出可能经高糖单核细胞EVs运载并干扰HUVECs中Nrf2表达的微小RNA（microRNA,miRNA）,并检验该miRNA对HUVECs细胞增殖、迁移功能、氧化应激及Nrf2、NLRP3信号通路的调控作用。最后构建1型糖尿病小鼠模型并验证抑制该miRNA对糖尿病小鼠主动脉的保护作用。研究结果:1.透射电子显微镜、纳米颗粒跟踪分析及WB的结果证实实验操作可稳定分离出THP-1 EVs;标记于THP-1 EVs的PKH-67染剂可染至共培养的HUVECs表面;生理糖浓度及高糖浓度的THP-1 EVs均可促进HUVECs增殖,但无显著组间差异;高糖THP-1 EVs显著抑制了 HUVECs的迁移能力,并增加了HUVECs中活性氧（Reactive oxygen species,ROS）的生成,提示HUVECs氧化应激水平的提高;WB结果显示高糖THP-1 EVs抑制了 HUVECs中Nrf2信号通路的表达并激活了 NLRP3信号通路,提示高糖THP-1 EVs可促内皮细胞炎症。2.通过公共miRNA数据库、RT-qPCR及双荧光素酶报告基因验证,miR-142-5p在高糖THP-1 EVs中高表达,且经高糖THP-1 EVs作用后HUVECs内miR-142-5p显著上调;改变miR-142-5p表达量并不影响HUVECs的增殖能力;上调miR-142-5p则显著抑制HUVECs的迁移能力并提高ROS生成,而下调miR-142-5p则可缓解高糖对HUVECs迁移能力的抑制及氧化应激;上调miR-142-5p抑制了 HUVECs中Nrf2信号通路并上调了 NLRP3信号通路表达,而抑制miR-142-5p则引起Nrf2信号通路上调并负向调控NLRP3信号通路。3.成功构建1型糖尿病小鼠模型,并经尾静脉注射miR-142-5p抑制核酸（Antagomir）14周后取主动脉组织苏木精-伊红染色未见血管出现明显形态学改变;免疫组织化学结果提示糖尿病小鼠血管壁白介素-1β（Interleukin-1β,IL-1β）表达量显著上调;而注射miR-142-5p Antagomir组的糖尿病小鼠IL-1β则明显减少。研究结论:1.高糖诱导单核细胞分泌的细胞外囊泡可抑制血管内皮细胞迁移能力,并诱导血管内皮细胞氧化应激及炎症;2.高糖诱导单核细胞分泌的细胞外囊泡可能通过运载miR-142-5p进入内皮细胞,并抑制血管内皮细胞迁移能力、诱导氧化应激及炎症;3.抑制miR-142-5p可有效缓解糖尿病引起的血管壁炎症;4.抑制miR-142-5p有望成为糖尿病血管病变的创新防治靶点,并具有一定的临床转化前景。