2002年底,在我国南方发现了一种新型的传染性严重急性呼吸系统综合征（severe acute respiratory syndrome,SARS）,并波及众多国家和地区,引起广泛关注。随后经过各国研究者通力合作,很快确证了一种新的冠状病毒为导致该疾病的病原体,并命名为SARS相关冠状病毒（SARS-CoV）。紧接着完成了SARS-CoV的基因组测序,并通过多种途径分析了其基因组结构特征。据预测,SARS-CoV的基因组有14个潜在的编码蛋白大于40个氨基酸的开放阅读框架（ORF）,包括复制相关蛋白酶基因和四个主要的结构蛋白（S、M、N、E）基因,以及几个与其它已知蛋白无明显同源性的未知蛋白的编码基因。未知蛋白X2由ORF4编码,共154个氨基酸,与其它已知蛋白没有明显的同源性。本研究把X2基因插入绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-N1、pEGFP-C1和载体pCMV-myc,构建重组质粒,转染293、COS-7和VERO细胞,通过细胞荧光和免疫荧光观察发现,X2蛋白定位于细胞核,并且呈点状聚集;进一步与核仁蛋白C23共定位,发现X2蛋白定位于核仁,且在不同细胞中,X2蛋白的定位状态表现一致。通过构建一系列X2蛋白缺失突变体与EGFP融合表达载体,在转染细胞内进行与C23的共定位,发现X2的核仁定位信号位于C端的134-154位氨基酸残基,这与用生物信息学方法分析的结果一致。采用流式细胞仪分析,发现X2蛋白的表达能引起Vero、293和COS-7细胞出现G₀/G₁期阻滞,并且能够诱导COS-7细胞发生凋亡。这些结果为进一步研究X2蛋白在SARS-CoV的复制、感染和致病方面的作用提供了有用的参考信息。