【摘 要】
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目的探讨肺炎克雷伯菌转录调控子RcsAB对菌株超粘性和生物膜形成能力的影响,通过构建肺炎克雷伯菌rcsA、rcs B及rcsAB基因缺失的无痕突变株和对应的回补株,对其菌株超粘性和
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目的探讨肺炎克雷伯菌转录调控子RcsAB对菌株超粘性和生物膜形成能力的影响,通过构建肺炎克雷伯菌rcsA、rcs B及rcsAB基因缺失的无痕突变株和对应的回补株,对其菌株超粘性和生物膜表型进行测定,期间以野生株作为对照,分析RcsAB在菌株超粘性和生物膜形成中的功能。方法首先构建突变株Δrcs A、ΔrcsB和ΔrcsAB,PCR扩增rcsA、rcsB基因上下游同源臂片段,克隆到质粒p KO3-Km上,将重组质粒导入肺炎克雷伯菌NTUH-K2044中,经同源重组后筛选得到无痕突变株。然后构建回补株,扩增rcsA、rcsB基因片段,克隆到质粒pBAD33上,将重组质粒导入相应突变株,得到回补株。粘度实验测定野生株、突变株、回补株的超粘性。用结晶紫染色的方法测定菌体生物膜形成能力。结果成功构建rcsA、rcsB基因缺失的无痕突变株Δrcs A、ΔrcsB、ΔrcsAB和回补株C-ΔrcsA、C-ΔrcsB、C-rcsA-ΔrcsAB、C-rcsB-ΔrcsAB。与野生株相比,突变株超粘性和生物膜形成能力均减弱。回补株C-ΔrcsB回补表型介于野生株突变株之间,其他回补表型不明显。结论转录调控子RcsAB对肺炎克雷伯菌超粘性和生物膜形成具有正向调控作用。
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