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目的:利用SEREX技术筛选本实验室已构建好的中国北方地区人类风湿关节炎滑膜组织cDNA表达文库,以期获得与中国北方人类风湿关节炎相关的特异性抗原分子,一方面可以明确类风湿关节炎的抗原致病性质,进一步阐明疾病的发病机制,并且也为实施免疫治疗奠定基础;另一方面可以据此合成具有诊断意义的肽段,对类风湿关节炎的早期特异性诊断指标常规、标准化的应用做前期铺垫工作。 方法:使用类风湿关节炎患者的混合血清对中国北方地区人类风湿关节炎滑膜组织cDNA表达文库进行SEREX免疫筛选,经过3轮筛选后使用双抗体夹心ELISA方法初步鉴定筛选出的阳性克隆与类风湿关节炎患者血清的结合力,然后将阳性克隆PCR扩增、纯化后进行测序,测序结果在NCBI网站进行BLAST基因比对分析,并据此推导特异性阳性克隆的氨基酸序列。 结果:最终经过对文库的三轮筛选后获得了12个阳性克隆,通过双抗体夹心ELISA初步鉴定均与类风湿关节炎患者血清特异性结合,阳性克隆经PCR扩增后通过琼脂糖凝胶电泳分析,显示11个阳性克隆有插入片段,将这11个阳性克隆纯化后测序,根据碱基序列进行推导,获得了这些阳性克隆所展示的氨基酸序列。 结论:利用SEREX方法筛选中国北方地区人类风湿关节炎滑膜组织cDNA表达文库,获得与类风湿关节炎患者血清中抗体特异性结合的阳性克隆,将阳性克隆纯化后测序得到出现频率较高的相同短肽序列,有望成为类风湿关节炎特异的候选血清学标志物应用于疾病早期诊断和疫苗的研制,并有助于阐明类风湿关节炎的发病机制。