SEREX法筛选中国北方地区RA患者cDNA文库

来源 :哈尔滨医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:babaxsj
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:利用SEREX技术筛选本实验室已构建好的中国北方地区人类风湿关节炎滑膜组织cDNA表达文库,以期获得与中国北方人类风湿关节炎相关的特异性抗原分子,一方面可以明确类风湿关节炎的抗原致病性质,进一步阐明疾病的发病机制,并且也为实施免疫治疗奠定基础;另一方面可以据此合成具有诊断意义的肽段,对类风湿关节炎的早期特异性诊断指标常规、标准化的应用做前期铺垫工作。  方法:使用类风湿关节炎患者的混合血清对中国北方地区人类风湿关节炎滑膜组织cDNA表达文库进行SEREX免疫筛选,经过3轮筛选后使用双抗体夹心ELISA方法初步鉴定筛选出的阳性克隆与类风湿关节炎患者血清的结合力,然后将阳性克隆PCR扩增、纯化后进行测序,测序结果在NCBI网站进行BLAST基因比对分析,并据此推导特异性阳性克隆的氨基酸序列。  结果:最终经过对文库的三轮筛选后获得了12个阳性克隆,通过双抗体夹心ELISA初步鉴定均与类风湿关节炎患者血清特异性结合,阳性克隆经PCR扩增后通过琼脂糖凝胶电泳分析,显示11个阳性克隆有插入片段,将这11个阳性克隆纯化后测序,根据碱基序列进行推导,获得了这些阳性克隆所展示的氨基酸序列。  结论:利用SEREX方法筛选中国北方地区人类风湿关节炎滑膜组织cDNA表达文库,获得与类风湿关节炎患者血清中抗体特异性结合的阳性克隆,将阳性克隆纯化后测序得到出现频率较高的相同短肽序列,有望成为类风湿关节炎特异的候选血清学标志物应用于疾病早期诊断和疫苗的研制,并有助于阐明类风湿关节炎的发病机制。
其他文献
如何在有限的置业指标和稀缺的别墅市场中选择一套性价比值最高的物业,成为高资产财富人群共同探讨的话题。北京独栋别墅的价格从千万级到亿元级均有分布,但最主流的产品价格
期刊
目的:研究不同水平的低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoproteincholesterol,LDL-C)人群与其肱踝脉搏波传导速度(Brachial-ankle pulse wavevelocity,baPWV)之间的关系;探讨其
经济的飞速发展,极大地推进了我国社会主义建设的进程.在国家大力惩治腐败、实施反腐倡廉政策的新时期,深入挖掘以井冈山为代表的江西红色廉政文化资源,分析新时期廉政文化建
在网络上,有这样一张照片广为流传:一个瘦瘦的青年,稚嫩的面孔,坚定的眼神,自信的表情,他盘腿坐在实验室里,背景写满了物理公式.这位沉迷科研的青年,就是曹原.rn2018年3月5日
期刊
近几十年小细胞肺癌(SCLC)在传统化疗方面进展迟缓,治疗后很快出现复发转移对SCLC患者的长期生存构成了巨大的威胁。相对于非小细胞肺癌(NSCLC)靶向治疗方面取得的巨大成果,SCL
在全球化环境中,东西方非物质文化遗产的外宣翻译交流成了文化潮流中一种势不可挡的趋势,但对于非物质文化遗产的保护问题也势必成为当前的重要任务之一.基于译介的背景,从非
目的:应用超声应变率成像技术(Strain Rate Imaging,SRI)测定糖尿病患者腹主动脉前、后壁的位移(TT)、应变(ST)及应变率(SR)等参数,观察糖尿病患者腹主动脉弹性的变化情况,为早期
审对题,是写好应试作文的首要前提.作文评分标准中,对切题的要求通常有四个等次:一等为切合题意,二等为符合题意,三等为基本符合题意,四等为偏离题意.作文一旦出现扣题不紧的
期刊
天阴沉沉的,厚厚的、低低的、灰黄色的浊云压得人喘不过气来.rn这一天,二儿子出去当兵了.在从前,当兵是升官发财的捷径,但现在不同,稍有知识的人都是抱着为救国而牺牲的目的
期刊