CacyBP/SIP过表达对卵巢子宫内膜异位症在位内膜间质细胞生物学功能的影响

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目的:探讨CacyBP/SIP过表达对卵巢子宫内膜异位症(Ovarian endometriosis,OEMs)在位内膜间质细胞生物学功能的影响。方法:1、体外提取卵巢子宫内膜异位症患者在位内膜间质细胞,使用重组CacyBP/SIP慢病毒转染细胞之后检测病毒转染结果;2、实验分3组。实验组(Lv-hCacyBP/SIP group):表达CacyBP/SIP重组慢病毒Lv-hCacyBP/SIP处理在位内膜间质细胞;慢病毒阴性对照组(Lv-control group):慢病毒载体处理在位内膜间质细胞;空白对照组(untreated group):细胞无处理;3、CCK-8法检测细胞增殖能力;4、Transwell检测细胞迁移和侵袭能力;5、流式细胞仪技术检测细胞凋亡情况。结果:1、体外成功分离培养卵巢子宫内膜异位症患者在位内膜间质细胞;2、成功构建重组慢病毒,应用Western-Blot检测转染后各组实验细胞中CacyBP/SIP表达量:Lv-hCacyBP/SIP group(0.676±0.031),Lv-control group(0.251±0.001),两组比较,差异有统计学意义(t=21.231,P=0<0.000);Lv-control group(0.251±0.001),untreated group(0.250±0.007),两组比较,差异无统计学意义(t=0.109,P=0.921);3、CCK-8法检测细胞增殖实验结果表明:转染24h后,Lv-hCacyBP/SIP group的A值(0.247±0.007)与Lv-control group的A值(0.260±0.004)比较,差异无统计学意义(t=2.641,P=0.057);Lv-control group的A值(0.260±0.004)与untreated group的A值(0.257±0.006)比较,差异无统计学意义(t=0.741,P=0.500)。转染48h之后,所有Lv-CacyBP/SIP group的A值与Lv-control group的A值比较,差异有统计学意义(P<0.05);Lv-control group的A值与untreatedgroup(0.379±0.009)的A值比较,差异无统计学意义(P>0.05);4、Transwell检测细胞迁移能力:Lv-hCacyBP/SIP group细胞迁移数(134±21.5)与Lv-control group细胞迁移数(224±12.0)比较,差异有统计学意义(t=6.338,P=0.003);Lv-control group细胞迁移数(224±12.0)与untreated group细胞迁移数(226±15.2)比较,差异无统计学意义(t=0.207,P=0.846);5、Transwell检测细胞侵袭能力:Lv-hCacyBP/SIP group细胞穿膜数(92.33±6.8)与Lv-control group细胞穿膜数(128.67±4.7)比较,差异有统计学意义(t=5.713,P=0.029);Lv-control group细胞穿膜数(128.67±4.7)与untreated group细胞穿膜数(125.33±10.1)比较,差异无统计学意义(t=0.459,P=0.691);6、流式细胞仪技术检测细胞凋亡:Lv-hCacyBP/SIP group细胞凋亡率(8.066±2.85)%与Lv-control group细胞凋亡率(8.865±0.03)%比较,差异无统计学意义(t=0.481,P=0.677);Lv-control group细胞凋亡率(8.865±0.03)%与untreated group细胞凋亡率(8.433±1.48)%比较,差异无统计学意义(t=0.490,P=0.650)。结论:CacyBP/SIP过表达能抑制OEMs在位间质细胞增殖、迁移及侵袭能力,但对细胞凋亡无明显影响。
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