目的 本课题应用细胞培养技术，以软骨细胞增殖代谢活力以及胶原合成为指标，观察比较不同浓度17β-雌二醇（E₂）对成年雌兔关节软骨细胞的作用，探察是否有一氧化氮（NO）在其中发挥中介作用。目的在于除外其他激素、血清、以及多种生长因子等因素的影响，研究评价雌激素对体外培养关节软骨细胞功能代谢的单一作用，建立体外雌激素对成年雌兔关节软骨细胞作用的模型。探讨雌激素在骨关节炎发病机制中的作用，为进一步开展骨关节炎和相关疾病的基础研究提供实验依据和新思路，为骨关节炎的临床科研和预防研究提供理论线索。 材料和方法 本实验所用雌激素为购自Sigma公司的17β-雌二醇，软骨细胞取自成年（12月龄）雌性新西兰大白兔，体外单层培养，取生长良好的第二代传代细胞实验，采用不同浓度的17β-雌二醇与软骨细胞共同孵育24或48小时后检测结果。应用（1）羟脯氨酸试剂盒（化学比色法）检测细胞间质中Ⅱ型胶原含量（2）MTT比色法观察细胞增殖与能量合成情况（3）一氧化氮试剂盒（硝酸还原酶化学比色法）检测细胞培养液中NO的含量（4）一氧化氮合成酶（NOS）试剂盒（化学比色法）测定细胞培养液中NOS活力。应用方 门－D雌二醉对体外培养成年雌免关节软骨细胞的作用及其与一氧化凤的关系 差分析对测定结果（OD值）进行统计学处理。 结果：＊)在 10““、0－hol／L剂量范围 170－雌二醇对软骨细胞的 胶原合成没有显著性作用，各组与对照组比较，尸＞O．05；但对其增 殖与能量代谢却有抑制作用，各组与对照组比较，尸＜o．01。（z） 在1旷习0”m1几剂量范围，17卜雌二醇对软骨细胞的胶原合成与 能量代谢均具有抑制作用，各组与对照组比较，尸＜0．01。3)在 10－’l0－＊ol／L剂量范围，17B－雌二醇能促进软骨细胞合成NOS，增 加NO 的产生，各组与对照组比较，尸＜O．01；但无组间差异性， 各组刑比较，尸＞O．05。 结论17 p－雌二醇对体外培养成年雌兔关节软骨细胞的增殖代谢与 胶原合成均具有直接的调节作用，这种作用与雌激素剂量呈显著性 相关，但在上述两方面的影响却“并不完全一致”。NO可能是雌激 素对软骨发挥抑制作用的中介因素之一。