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目的:脑出血后脑组织死亡的细胞中只有10%-20%来自血肿的直接损伤,绝大多数细胞死亡是由于脑出血所继发的炎症反应和凋亡。继发性脑损伤主要由血肿占位及压迫效应、脑水肿、血脑屏障的破坏、以及一系列炎症反应造成。已有研究发现,组织蛋白酶B、D参与脑出血后炎症反应,但是其具体机制不明,而外周血单个核细胞在脑出血后进入脑组织,参与脑组织炎症反应。本研究从小鼠外周血单个核细胞入手,探讨脑出血后外周血单个核细胞中组织蛋白酶表达水平与脑出血后炎性损伤的关系。研究方法:1、通过注射新鲜自体动脉血的方法建立小鼠脑出血模型,采用眼球取血的方法收集健康对照组和脑出血后不同时间点小鼠的外周血,通过密度梯度离心法从采集的新鲜抗凝血液标本中分离出单个核细胞,迅速-80℃保存。提取总RNA和蛋白质,通过RT-PCR和Western blot检测组织蛋白酶B、D的表达。2、分别用Ca-074me和Pepstatin A抑制组织蛋白酶B和D的表达,用RT-PCR和Western blot验证抑制效果。通过28分神经功能缺损评分量表对小鼠进行神经功能评分,用干湿重法检测小鼠脑组织水含量变化,通过静脉注射依文思蓝的方法检测小鼠血脑屏障损伤程度变化,通过血红蛋白含量测定的方法检测小鼠血肿体积的变化。结果:1、相对于正常对照组,脑出血后小鼠外周血单个核细胞中组织蛋白酶B、D表达均升高,并于脑出血后1天时达到顶峰,之后逐渐降低。2、通过腹腔注射Ca-074me和Pepstatin A可以分别有效抑制外周血单个核细胞中组织蛋白酶B和D的表达。且当外周血单个核细胞中组织蛋白酶B和D被抑制后,小鼠神经功能缺损评分降低,脑组织含水量降低,血脑屏障损伤程度也明显减轻,血肿吸收速度加快。结论:1、脑出血后外周血单个核细胞中组织蛋白酶B、D表达升高;2、抑制外周血单个核细胞中组织蛋白酶B、D表达可有效减轻脑出血后神经功能损伤,降低脑组织含水量,减轻血脑屏障破坏程度,加速血肿吸收。