转录因子在非小细胞肺癌干细胞中异常表达的相关研究

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肺癌的死亡率居全世界恶性肿瘤的第一位,并且呈逐年上升趋势。肿瘤干细胞是存在于肿瘤细胞中的一个亚群,因与肿瘤的发生、进展、转移及耐药的密切相关使其越来越受到研究者的关注。而转录因子不仅在哺乳动物的各类干细胞分化成不同类型等级功能细胞的这个过程起到重要的调节作用,并且可将体细胞重编程成为诱导多能干细胞。从发现重要的多能性因子与人类多种恶性肿瘤相关,到成功利用转录因子将已分化的肿瘤细胞诱导成干性细胞,特定的转录因子是肿瘤干细胞特异的基因调控程序,也为治疗提供新的潜在治疗靶点。目的:本次研究重点关注非小细胞肺癌干细胞中表达异常且具有特异性调节作用的一类转录因子。探究其在非小细胞肺癌细胞系及临床病理样本中的表达情况。方法:1.通过无血清低粘附的方法富集肺癌干细胞,经基因芯片检测基因表达,利用生物信息学分析,筛选可能具有潜在作用的转录因子;2.利用实时定量荧光PCR以及蛋白质印迹法验证相关转录因子在不同肺癌细胞系及原代肺癌细胞株中mRNA和蛋白质水平表达情况;3.通过免疫组化,检测肺癌标本中相关转录因子的表达情况;4.进一步构建稳定过表达相应转录因子的细胞系,探索其是否与克隆球形成能力相关。结果:1.通过基因芯片检测结果筛选到BRF2、EGR1、ID2、PBX1、PRDM1、 HES1、HEY1、RUNX2等转录因子在肺癌干细胞中表达显著性上调;2. BRF2、 EGR1、ID2、PBX1、PRDM1、HES1、RUNX2在不同肺癌细胞系及原代肺癌细胞株的干性细胞中mRNA和蛋白质水平增高;3.在肺癌病理组织中均有BRF2、 EGR1、ID2、PBX1、PRDM1、HES1、HEY1、RUNX2阳性表达;4.ID2可促进肺癌细胞克隆球形成。结论:我们推测BRF2、EGR1、ID2、PBX1、PRDM1、HES1、HEY1、 RUNX2是肺癌干细胞中潜在的调控因子,其中ID2可能与促进非小细胞肺癌干细胞生成相关。
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