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目的:临床研究验证凉血潜阳法治疗寻常型银屑病“血热证”临床疗效、安全性及对Wnt信号通路的影响。基础研究从DNA甲基化修饰WIF-1调控Wnt信号通路角度,研究表观遗传修饰Wnt通路在寻常型银屑病“血热证”中的作用,并进一步阐释凉血潜阳法作用机制。方法:第一部分采用随机对照试验设计,将80例患者随机分为凉血潜阳法辨证加减组和固定方组,分别予8周口服药物治疗,采用银屑病面积及严重度指数评分法(Psoriasis Area Severity Index,PASI)评价其临床疗效和安全性;同时以正常组织为对照,选取银屑病血热证、凉血潜阳治疗愈显和无效患者,采用免疫组化法检测WIF-1、STAT3、Wnt-5a、β-Catenin蛋白表达与分布。第二、第三部分为在体和离体实验相结合,在体实验以银屑病患者皮损和正常受试者皮肤为研究对象,运用亚硫酸盐扩增子测序、q PCR、Western blot、免疫组化技术检测WIF-1甲基化状态、相关基因和蛋白表达;离体实验以Ha Ca T细胞为研究对象,采用WIF-1 sh RNA转染和去甲基化方法,通过功能学研究评价WIF-1表达沉默对Wnt信号通路调控细胞增殖、凋亡生物学行为影响。结果:第一部分:凉血潜阳法辨证加减组总有效率(87.50%)高于固定方组(84.21%),但两组疗效无显著性差异(P>0.05),两组患者PASI评分用药8周后均显著下降(P<0.001),研究期间均未出现明显的药物不良反应。与正常组织比较,患者WIF-1/STAT3比值显著下降(P<0.05);Wnt-5a/STAT3比值显著升高(P<0.05)。第二部分:银屑病血热证患者皮损WIF-1基因启动子甲基化比例86.296%,显著高于正常组织77.778%(P<0.05),其中启动子45、86、100、197、221、240、247、266、276、285、353和366Cp G位点甲基化水平显著升高(P<0.05),WIF-1m RNA和蛋白表达显著下调(P<0.05)。IL-17刺激的Haca T细胞WIF-1基因甲基化程度、细胞凋亡率和Ki67表达显著升高(P<0.05),5-Aza-d C处理使WIF-1基因甲基化程度、细胞凋亡率和Ki67表达显著下降(P<0.05)。第三部分:凉血潜阳治疗愈显患者组织WIF-1启动子区Cp G位点甲基化比例79.259%显著低于银屑病血热证及凉血潜阳治疗无效患者86.296%(P<0.05),其中启动子45、100、122、177、197、221、247和366Cp G位点甲基化水平显著下降(P<0.05),WIF-1 m RNA和蛋白表达显著上调(P<0.05)。凉血潜阳含药血清培养的Haca T细胞WIF-1基因甲基化程度、细胞凋亡率和Ki67表达显著下降(P<0.05)。结论:凉血潜阳法治疗寻常型银屑病血热证安全、有效;寻常型银屑病血热证患者皮损WIF-1基因启动子高甲基化状态致Wnt通路异常活化;凉血潜阳法通过降低WIF-1启动子区甲基化水平,抑制Wnt通路,治疗银屑病血热证。