降香的化学成分研究

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降香为豆科(Leguminosae)植物降香檀Dalbergia odorifera T.Chen树干和根的干燥心材。2020年版《中国药典》记载其具有化瘀止血,理气止痛的功效,用于治疗吐血,衄血,外伤出血,肝郁胁痛,胸痹刺痛,跌扑伤痛,呕吐腹痛等。降香在中医临床上常与其他药材配伍用于治疗心血管疾病,如复方丹参注射液、芪参益气汤和冠心丹参片等。本课题组前期研究发现,降香总提物及其乙酸乙酯萃取部位均能够显著抑制凝血酶诱导的血小板释放ATP,但其活性成分有待进一步研究。为阐明降香的抗凝血活性成分,本研究对乙酸乙酯萃取部位进行了系统的化学成分研究,并对分离得到的单体化合物进行了活性筛选。主要获得了以下研究成果:1.文献综述通过查阅国内外文献,系统综述了降香植物化学成分及药理活性研究进展。文献研究表明,降香主要含挥发油、黄酮类化学成分;药理活性主要包括促血管新生、改善心肌功能、抗血栓和血小板凝集、抗氧化、抗炎等。2.降香的化学成分研究采用硅胶、ODS、Sephadex LH-20等多种柱色谱填料以及半制备HPLC等技术对降香乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位进行了系统的化学成分分离,利用紫外(UV)、红外(IR)、核磁(NMR)、高分辨质谱(HRMS)等波谱技术对化合物的结构进行了鉴定。从降香乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位中共分离得到了 67个单体化合物,包括10 个萜类化合物:thymol(3)、rel-(3S,6R,7S)-3,7,1 1-trimethyl-3,6-epoxy-1,10-dodecadien-7-ol(4)、rel-(3R,6R,7S)-3,7,11-trimethyl-3,7-epoxy-1,10-dodecadien-6-ol(5)、6-hydroxycyclonerolidol(6)、nerolidol(7)、hedychiolA(8)、7-hydroxy-6,7-dihydro-5,6E-dehydronerolidol(9)、(3S,6R,7S,10S)-2,6,10-trimethyl-3,6;7,10-diepoxy-1 1-dodecen-2-ol(10)、rel-(3S,6R,7S,10S)-2,6,10-trimethyl-3,6;7,10-diepoxy-2-dodecen-1 1-o1(11)、3β-乙酰基齐墩果酸(12);45个黄酮类化合物,包括了10个紫檀烷类:(6aS,11aS)-3,9-二甲氧基紫檀烷(13)、(6aS,11aS)-3-羟基-9-甲氧基紫檀烷(14)、(±)-3-羟基-4,9-二甲氧基紫檀烷(15a/15b)、(±)-3,8-二羟基-9-甲氧基紫檀烷(16a/16b)、(6aR,11aR)-4-羟基-3,9-二甲氧基紫檀烷(17)、(6aR,11aR)-3,4-二羟基-9-甲氧基紫檀烷(18)、(6aR,11aR)-6a-羟基-3,9-二甲氧基紫檀烷(19)、(6aR,11aR)-3-羟基-8,9-二甲氧基紫檀烷(20),8 个新黄酮类:(±)-2-hydroxy-4,5-dimethoxydalberyiquinol(21a/21b)、(R)-5-O-methyllatifolin(22)、(S)-mimosifoliol(23)、(R)-latifolin(24)、(S)-2,4-dimethoxy-5,3’-dihydroxy-dalbergiquinol(25)、(S)-2,4,5-trimethoxy-3’-hydroxy-dalbergiquinol(26)、(S)-4-methoxydalbergione(27),1 3 个二氢黄酮类:(±)-4’-甲氧基-3,7-二羟基二氢异黄酮(2a/2b)、(2S)-5,7-二羟基二氢黄酮(28)、(±)-7,2’,4’-三甲氧基二氢异黄酮(29a/29b)、(±)-7-羟基-2’,4’-二甲氧基二氢异黄酮(30a/30b)、(±)-7-羟基-2’,3’,4’-三甲氧基二氢异黄酮(31a/31b)、(2S)-7-羟基二氢黄酮(32)、(±)-4’,7-二甲氧基-3,2’-二羟基二氢异黄酮(33a/33b)、(2R,3R)-3,7-二羟基二氢黄酮(34),9个黄烷类:(3R)-7-羟基-4’-甲氧基异黄烷(35)、(±)-紫苜蓿烷(36a/36b)、(±)-7,4’-二甲氧基-2’-羟基异黄烷(37a/37b)、(3S)-7,3’-二羟基-2’,4’-二甲氧基异黄烷(38)、(±)-7,2’-二羟基-4’-甲氧基异黄烷(39a/39b)、(3R)-7,3’-二羟基-8,2’,4’-三甲氧基异黄烷(40),2个黄酮类:2’-羟基-7,4’-二甲氧基异黄酮(41)、7,4’-二甲氧基异黄酮(42),1个查耳酮类:isoliquiritigenin(43),以及2个异黄酮类衍生物:(±)-odoriferin(1a/1b);以及12个其他类化学成分:obtustyrene(44)、2-(2’,4’-二甲氧基苯基)-6-羟基苯并呋喃(45)、2-(2’-羟基-4’-甲氧基苯基)-6-羟基苯并呋喃(46)、2,4-二羟基-5-甲氧基二苯甲酮(47)、2,5-二羟基-4-甲氧基二苯甲酮(48)、(±)-riverinol(49a/49b)、methyl 4-hydroxybenzoate(50)、对羟基苯甲酸乙酯(51)、3’-methoxy-4’-hydroxy-trans-cinamaldehyde(52)、trans-p-coumaryl aldehyde(53)、(2S,3S)-5-hydroxy-6-methoxy-3-methyl-2-(4’-hydroxyphenyl)-2,3-dihydrobenzofuran(54)。其中,1a、1b、2a及2b为新化合物,为两对对映异构体。此外,化合物(3R)-7-羟基-4’-甲氧基异黄烷(35)首次从黄檀属中分离得到,(±)-紫苜蓿烷(36a/36b)及(S’)-mimosifoliol(23)首次从D.odorifera种中分离得到。3.单体化合物的活性筛选在化学成分研究的基础上,结合前期发现降香总提物及乙酸乙酯部位均能够显著抑制凝血酶诱导的血小板释放ATP,本文采用凝血酶诱导的血小板释放ATP模型和DPPH自由基清除实验对单体化合物进行活性筛选。结果显示:部分单体化合物能够很好地抑制凝血酶诱导的血小板释放ATP,其IC50值介于4.0~99.7 μM之间,说明具有潜在的抑制血小板聚集活性;降香中的部分黄酮类成分具有不同程度的DPPH自由基清除活性,表现出一定的抗氧化活性。
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