血清外泌体microRNA在阿尔茨海默病中的表达差异性研究

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目的:观察血清外泌体microRNA(NA)在阿尔茨海默病(AD)患者与对照组间的差异表达水平变化,以寻找可能预测AD的理想标志物。方法:选取2018年10月-2020年12月在我院收集的AD患者23例,同时选择与性别和年龄相一致的健康者23例为对照组。纳入标准:符合2011年修改制定的AD诊断标准(NIA-AA)。排除严重心肝脑肾等疾病。所有参与者留取空腹外周血标本5-10m L,然后提取血清外泌体,采用透射电镜和粒径分析仪观察外泌体的形态和大小。使用高通量测序对3例AD患者和3例正常对照组的血清外泌体NA表达谱进行筛查分析。然后扩大样本数量,提取20例AD患者和20例对照组的血清外泌体RNA,对所选出的差异NA进行q RT-PCR验证分析。采用ROC曲线评价外泌体NA预测AD的潜能。结果:1.透射电镜下可见外泌体形态为类圆形的小囊泡。粒径分析颗粒平均直径约为75.47nm。2.通过高通量测序结果,对AD组与对照组进行比较,筛选出了27个差异表达的血清外泌体NA,其中8个显著上调,19个显著下调。3.结合实验测序结果和文献回顾,筛选出与AD疾病相关的2种NA(hsa--126-5p和hsa--26b-5p),然后采用q RT-PCR验证,发现与对照组相比2种NA在AD中都表达下调,差异有统计学意义(P<0.05)。4.ROC曲线结果分析示hsa--126-5p和hsa--26b-5p有望成为预测AD的标志物,其中hsa--126-5p曲线下面积最大为84.8%。结论:本研究发现血清外泌体NA在AD中存在表达水平差异,其中有27种NA显著差异表达。经过筛选和验证后发现血清外泌体hsa--126-5p和hsa--26b-5p对预测AD方面有潜在的临床价值。
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