基于TLC自显影技术的锁阳抗氧化活性物质筛选研究

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锁阳为锁阳科锁阳属植物锁阳Cynomorium songaricum Rupr的干燥肉质茎,俗称“不老药”,多生长在干旱缺水及含碱的沙地,主产于中国西北部和亚洲中部地区。其味甘,性温,具有滋补肾阳、润肠通便和益精血的功能。本文以锁阳为研究对象,以筛选锁阳中的抗氧化物质为目的,围绕提取工艺优化、抗氧化活性部位筛选及抗氧化活性物质筛选,开展了以下几方面的研究:(1)以CUPRAC法测得的锁阳中总抗氧化活性为评价指标,以液料比、溶媒浓度、提取时间为自变量,采用星点设计效应面法,优选锁阳总抗氧化物质的提取工艺。结果表明,当液料比13:1,乙醇浓度50%,提取时间1.5h,提取效果最优。(2)对锁阳不同提取部位的抗氧化活性进行体外、体内研究。体外采用CUPRAC法,分别测定锁阳乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位的抗氧化活性,筛选锁阳抗氧化活性部位。结果表明,乙酸乙酯部位的抗氧化活性最强,为锁阳的抗氧化活性部位。以D-gal造小鼠衰老模型,用锁阳不同提取部位做衰老小鼠的抗氧化研究,分别测定脑、肝、肾中的SOD、MDA、GSH-Px的水平,综合比较不同提取部位的体内抗氧化效果,结果为乙酸乙酯部位抗氧化效果最好。(3)以Cu2+-新亚通灵为自显影试剂,采用TLC自显影技术结合柱层析技术对锁阳活性部位中的抗氧化活性物质进行筛选分离,得到5个抗氧化活性物质,并运用1H-NMR、13C-NMR、ESI-MS等现代波谱技术确定其化学结构,分别为细梗香草内酯、原儿茶酸、儿茶素、没食子酸、表儿茶素没食子酸酯。此外,从锁阳乙酸乙酯部位还分离得到十八烷酸α-单甘油酯、β-谷甾醇、正丁酸、胡萝卜苷。
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