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本研究分为二部分:
第一部分:非小细胞肺癌患者外周血CD4+CD25hig h FOXP3+调节性T细胞的初步研究及其临床意义
目的:分析非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者外周血CD4+CD25high FOXP3+调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)占CD4+T细胞的比例变化规律及其功能分析,并初步探讨其临床意义。
方法:采用流式细胞术分析52例NSCLC患者和35例健康人外周血CD4+CD25high FOXP3+Tregs 占CD4+T细胞的比例,逆转录聚合酶链式反应(Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)分析CD4+CD25high Tregs FOXP3 mRNA的表达,Western BloT分析CD4+CD25high Tregs FOXP3 蛋白的表达,并对CD4+CD25high Tregs 进行功能分析。同时对CD4+CD25high FOXP3+Tregs 与肿瘤标志物CEA,CA125,CA199,β2-MG,CA153 进行相关性研究,Kaplan-Meier 生存分析研究外周血CD4+CD25high FOXP3+Tregs 与临床预后的关系。
结果:NSCLC患者外周血 CD4+CD25high FOXP3+Tregs 占CD4+T细胞的比例明显高于健康对照组(P<0.01),其中Ⅲ,Ⅳ期患者外周血CD4+CD25high FOXP3+Tregs 占CD4+T细胞的比例高于Ⅰ,Ⅱ期(P<0.01)。
该CD4+CD25high FOXP3+Tregs细胞高表达CTLA-4和GITR。对TCR刺激无反应,并抑制CD4+CD25-T细胞的增殖和其IL-2,IFN-γ的分泌。CD4+CD25high FOXP3+Tregs 与肿瘤标志物无明显相关性(P>0.05),Kaplan-Meier 生存分析表明,外周血CD4+CD25high FOXP3+Tregs 占CD4+T细胞的比例高者预后较差(P<0.05)。
结论: NSCLC患者外周血CD4+CD25high FOXP3+Tregs 占CD4+T细胞的比例升高;并抑制CD4+CD25-效应T细胞的功能,从而在肿瘤免疫逃逸中发挥重要的作用。CD4+CD25high FOXP3+Tregs 占CD4+T细胞的比例越高,预后越差,有可能成为提示肺癌预后的新指标。
第二部分:NSCLC患者胸水CD4+CD25high FOXP3+调节性T胞的初步研究及其临床意义
目的:分析NSCLC患者胸水CD4+CD25high FOXP3+Tregs 占CD4+T细胞的比例变化规律,并初步探讨其临床意义。
方法:采用流式细胞术分析比较25例NSCLC患者恶性胸水和15例非恶性肿瘤患者非恶性胸水CD4+CD25high FOXP3+Tregs 占CD4+T细胞的比例,以及比较10例NSCLC合并恶性胸水患者的外周血和胸水CD4+CD25high FOXP3+Tregs 占CD4+T细胞的比例。流式分析CD4+CD25high Tregs 上GITR,CTLA-4 and FOXP3的表达,激光共聚焦显微镜观察胸水单个核细胞(Peripheral Blood Mononuclear Cell,PBMC)中Tregs 上CD25和FOXP3的表达。
结果:NSCLC患者恶性胸水CD4+CD25high FOXP3+Tregs 占CD4+T细胞的比例高于非恶性胸水(P<0.01)。NSCLC患者恶性胸水CD4+CD25high FOXP3+Tregs 占CD4+T细胞的比例高于外周血(P<0.05),这些Tregs 高表达CTLA-4,GITR和FOXP3。激光共聚焦显微镜表明肺癌患者恶性胸水PBMC中Tregs表达CD25和FOXP3。
结论: NSCLC患者胸水CD4+CD25high FOXP3+Tregs 占CD4+T细胞的比例高于非恶性胸水及外周血Tregs 占CD4+T细胞的比例,这些细胞很可能通过抑制肿瘤免疫而促进局部肿瘤的生长。胸水CD4+CD25high FOXP3+Tregs 含量有可能成为鉴别良恶性胸水的新指标。
第一部分:非小细胞肺癌患者外周血CD4+CD25hig h FOXP3+调节性T细胞的初步研究及其临床意义
目的:分析非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者外周血CD4+CD25high FOXP3+调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)占CD4+T细胞的比例变化规律及其功能分析,并初步探讨其临床意义。
方法:采用流式细胞术分析52例NSCLC患者和35例健康人外周血CD4+CD25high FOXP3+Tregs 占CD4+T细胞的比例,逆转录聚合酶链式反应(Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)分析CD4+CD25high Tregs FOXP3 mRNA的表达,Western BloT分析CD4+CD25high Tregs FOXP3 蛋白的表达,并对CD4+CD25high Tregs 进行功能分析。同时对CD4+CD25high FOXP3+Tregs 与肿瘤标志物CEA,CA125,CA199,β2-MG,CA153 进行相关性研究,Kaplan-Meier 生存分析研究外周血CD4+CD25high FOXP3+Tregs 与临床预后的关系。
结果:NSCLC患者外周血 CD4+CD25high FOXP3+Tregs 占CD4+T细胞的比例明显高于健康对照组(P<0.01),其中Ⅲ,Ⅳ期患者外周血CD4+CD25high FOXP3+Tregs 占CD4+T细胞的比例高于Ⅰ,Ⅱ期(P<0.01)。
该CD4+CD25high FOXP3+Tregs细胞高表达CTLA-4和GITR。对TCR刺激无反应,并抑制CD4+CD25-T细胞的增殖和其IL-2,IFN-γ的分泌。CD4+CD25high FOXP3+Tregs 与肿瘤标志物无明显相关性(P>0.05),Kaplan-Meier 生存分析表明,外周血CD4+CD25high FOXP3+Tregs 占CD4+T细胞的比例高者预后较差(P<0.05)。
结论: NSCLC患者外周血CD4+CD25high FOXP3+Tregs 占CD4+T细胞的比例升高;并抑制CD4+CD25-效应T细胞的功能,从而在肿瘤免疫逃逸中发挥重要的作用。CD4+CD25high FOXP3+Tregs 占CD4+T细胞的比例越高,预后越差,有可能成为提示肺癌预后的新指标。
第二部分:NSCLC患者胸水CD4+CD25high FOXP3+调节性T胞的初步研究及其临床意义
目的:分析NSCLC患者胸水CD4+CD25high FOXP3+Tregs 占CD4+T细胞的比例变化规律,并初步探讨其临床意义。
方法:采用流式细胞术分析比较25例NSCLC患者恶性胸水和15例非恶性肿瘤患者非恶性胸水CD4+CD25high FOXP3+Tregs 占CD4+T细胞的比例,以及比较10例NSCLC合并恶性胸水患者的外周血和胸水CD4+CD25high FOXP3+Tregs 占CD4+T细胞的比例。流式分析CD4+CD25high Tregs 上GITR,CTLA-4 and FOXP3的表达,激光共聚焦显微镜观察胸水单个核细胞(Peripheral Blood Mononuclear Cell,PBMC)中Tregs 上CD25和FOXP3的表达。
结果:NSCLC患者恶性胸水CD4+CD25high FOXP3+Tregs 占CD4+T细胞的比例高于非恶性胸水(P<0.01)。NSCLC患者恶性胸水CD4+CD25high FOXP3+Tregs 占CD4+T细胞的比例高于外周血(P<0.05),这些Tregs 高表达CTLA-4,GITR和FOXP3。激光共聚焦显微镜表明肺癌患者恶性胸水PBMC中Tregs表达CD25和FOXP3。
结论: NSCLC患者胸水CD4+CD25high FOXP3+Tregs 占CD4+T细胞的比例高于非恶性胸水及外周血Tregs 占CD4+T细胞的比例,这些细胞很可能通过抑制肿瘤免疫而促进局部肿瘤的生长。胸水CD4+CD25high FOXP3+Tregs 含量有可能成为鉴别良恶性胸水的新指标。