本实验系统研究了猪卵母细胞的体外成熟、冷冻保存、体外受精及早期胚胎发育,着重研究了季节因素、FCS、pFF、胰岛素和17β-E2等对猪卵母细胞体外成熟的影响;研究了不同冷冻保护剂、不同处理方法、不同发育阶段卵母细胞的OPS冷冻效果;并探讨了不同的受精液、不同的Caffeine浓度对体外受精的影响,还对不同的蛋白质添加物、胰岛素、谷氨酰胺对早期胚胎发育的影响进行了研究。结果,(1)春秋季节的猪卵母细胞成熟率高于夏冬季节(P<0.05),卵泡期卵巢采集的猪卵母细胞成熟率和卵裂率均显著高于黄体期,添加10%FCS、10%pFF、20%FCS和10%FCS+10%pFF的卵裂率差异不显著(P>0.05),培养液中添加一定量的胰岛素和17β-E2有助于提高成熟率和卵裂率;(2)用5%PVP+梯度EG作为冷冻保护剂效果最好,GV期(12h)的卵母细胞的冷冻效果好于其它时期,CB处理可提高卵母细胞解冻后的卵裂率,离心不利于解冻的进一步发育;(3)添加5mM Caffeine的mBO的受精效果最好,培养24h后添加FCS可进一步提高胚胎发育能力,添加胰岛素和谷氨酰胺可提高胚胎发育能力。结论,(1)用含有10%FCS的NCSU-23成熟液体外培养猪卵母细胞,培养的前24h在培养液中加入激素,后24h不加激素的成熟效果最好;(2)体外成熟12h的猪卵母细胞(GV期)用5%PVP+EG做为玻璃化冷冻保护剂,5步OPS冷冻法的冷冻效果最好;(3)含5mM Caffeine的mBO受精液的受精效果最好。