背景高危型人乳头状瘤病毒(High risk human papilomavirus, HR-HPV)的感染是导致宫颈浸润癌(invasive cervical cancer, ICC)和子宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia, CIN)发生的主要致病因素。文献报道在CIN和ICC中p16INK4a蛋白表达与病变程度密切相关,主要在进展期表达。作为HPV病毒的主要结构蛋白,HPV L1壳蛋白是人体对HPV免疫的主要攻击位点,主要表达于病毒的早期复制期,在进展期表达消失。p16INK4a蛋白与高危型HPV或高危型HPV的不同亚型的关系及p16INK4a蛋白与L1壳蛋白联合表达在预测CIN转归中的意义,需要深入探讨。目的探讨宫颈病变中p16INK4a蛋白与HPV病毒的关系及其与L1壳蛋白的联合表达意义方法为确定宫颈病变中p16INK4a蛋白与HR-HPV的关系,对97例CIN1、32例CIN2、30例CIN3、4例ICC及随机选取的161例正常组织,共324例进行p16INK4a蛋白免疫组织化学染色,并采集研究对象的阴道分泌物、宫颈细胞学样本进行第二代杂交捕获实验(hybrid capture 2, HC2)。为探讨宫颈病变中p161NK4a蛋白与HPV各亚型的关系及其与L1壳蛋白联合表达方式,共分析188份病理标本：45例CIN1,31例CIN2,64例CIN3,48例ICC。用三明治切片法,第一张和最后一张蜡卷用于HE染色,中间蜡卷用于DNA提取和p16INK4a蛋白及L1壳蛋白免疫组化标记。HE切片由病理专家组完成诊断。将经过病理确认合格的蜡卷提取DNA,以SPF10为引物扩增,以DNA酶免疫分析(DEIA)确定有无HPVDNA阳性,然后LiPA法对扩增产物进行型别判断。同时进行p16INK4a蛋白和L1壳蛋白免疫组织化学染色。为探讨p16INK4a蛋白与L1壳蛋白的联合表达方式对于预测CIN1进展的意义,随访CIN1病例6年,45例CIN1均来自第二部分病例。结果HR-HPV阳性组和阴性组的p16INK4a蛋白的表达率分别为69.5%和10.5%,两组的p16INK4a蛋白的表达率差异有统计学意义(3(2=40.40,P=0..000)。瘤变组织中HR-HPV DNA阳性与p161NK4a蛋白阳性的总的关联强度OR值为19.36(6.39,58.61)。在本组CIN2、CIN3、ICC中,共可以检测到15种不同的HPV亚型,其中包括高危型16、18、31、33、39、51、52、53、56、58和66,低危型6、11、68、74。CIN2中DNA阳性率最多的HPV亚型依次是HPV16、HPV33和HPV58,CIN3中HPV亚型依次是HPV16、HPV58和HPV33,ICC中的HPV亚型依次是HPV16、HPV18和HPV31。HPV16DNA阳性组p16INK4a蛋白的表达率为93.8%,DNA阴性组的表达率为41.8%,HPV16的DNA阳性与p16INK4a蛋白的表达正相关(P<0.001)。HPV16DNA阳性组L1壳蛋白的表达率为12.4%,HPV16 DNA阴性组的表达率为34.2%,HPV16的DNA阳性与L1壳蛋白的表达负相关(P<0.001)。HPV33、HPV18、HPV31、HPV58等各亚型的DNA阳性与L1及p16INK4a蛋白的表达无明确相关性(p>0.05)。根据L1及p16INK4a蛋白表达情况,将研究对象分为四组,即1)L1(+)/p16INK4a(-)组24例,主要为CIN1,没有CIN3或ICC。2)L1(+)/p16INK4a(+)组19例,在CIN1、CIN2、CIN3和ICC中分别为31.6%、26.3%、31.6%、10.5%。3)L1(-)/p16INK4a(-)组31例,其中CIN1为48.4%,CIN2为25.8%、CIN3和ICC分别为16.1%、9.7%.4)L1(-)/p16INK4a(+)组114例,主要为CIN3和ICC(83.2%)。随诊显示,L1(-)/p16INK4a(-)表达方式的患者,无一例进展,L1(-)/p16INK4a(+)表达方式的患者,进展率为66.7%(2/3),L1(+)/p16INK4a(-)表达方式的患者,病变进展率为9.5%(2/21),L1(+)/p16INK4a(+)表达方式的患者,疾病进展率为33.3%(2/6)。结论p16INK4a蛋白与HR-HPV特别是HPV16正相关,CIN1中L1壳蛋白及p16INK4a蛋白的不同联合表达方式可更好的预测CIN1疾病的进程。