【摘 要】
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地中海拟无枝菌酸菌(Amycolatopsismediterranei)U-32是一种临床上重要的抗生素—力复霉素SV的产生菌。研究表明，在地中海拟无枝菌的力复霉素生物合成过程中，3-氨基5-羟基苯甲
【出 处】
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中国科学院上海植物生理研究所 中国科学院上海植物生理生态研究所 中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所 中国科学
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地中海拟无枝菌酸菌(Amycolatopsismediterranei)U-32是一种临床上重要的抗生素—力复霉素SV的产生菌。研究表明，在地中海拟无枝菌的力复霉素生物合成过程中，3-氨基5-羟基苯甲酸合酶是合成中间体AHBA的关键酶。该项研究通过筛选以广宿主粘粒载体构建的地中海拟无枝菌酸菌U-32的基因文库，获得6个阳性克隆子。头状轮生链霉菌(Streptoverticilliumcaespitosus)ATCC27422是抗肿瘤药物丝裂霉素C的主要产生菌，实验以丝裂霉素C敏感的阻断变种S-6为受体宿主，以质粒pIJ699为载体，建立野生型头状轮生链霉菌ATCC27422的基因库。采用鸟枪法克隆技术，从库中筛选获得含有丝裂霉素C抗性基因的6.6kb的片段的克隆子，并对此外源片段进行一系列亚克隆，将丝裂霉素C抗性基因定位在3.14kb的片段中。序列分析的结果表明:该3.1kb外源片段中存在一长度为1347bp的完整的开放阅读框架(ORF)，起始密码子为ATG，终止密码子为TGA，共编码448个氨基酸。所克隆到mcr基因能在T<，7>启动子控制下获得诱导表达，蛋白分子量约为50kDa，且该菌对丝裂霉素C抗性得到上百倍的提高。
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