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本论文采用水提法提取几种人参茎叶皂苷,再用硅胶柱层析法分离人参皂苷单体Rbl,Rc,Rd,在制备底物基础上对转基因酶Ⅲ型人参皂苷酶的反应条件进行了研究。采用水提法对人参茎叶和西洋参茎叶总皂苷进行提取,人参茎叶提取率为6.02%,西洋参茎叶提取率为5.01%。三种人参茎叶总皂苷TLC检测和HPLC检测结果表明,人参茎叶中主要皂苷为Rgl、Re、Rd、Rc,其中Re、Rd、Rgl皂苷的含量较高,占总皂苷的53.7%。西洋参茎叶中主要皂苷为Rb3、Rd、Re、Rc,其中Rb3、Rd含量较高,占总皂苷含量的38.3%。三七参茎叶中主要皂苷为Rc、Rb3、Rd,其中Rb3含量较高,占总皂苷含量的17.2%。40g人参茎叶总皂苷采用硅胶柱层析法进行分离,得到较纯的人参皂苷单体Rbl4.64g,得率为11.6%,纯度为96.0%；得到较纯的人参皂苷单体Rc 4.14g,得率为为10.4%,纯度为82.1%；较纯的人参皂苷单体Rd 5.38g,得率为13.8%,纯度为95%。在制备底物基础上对转基因酶Ⅲ型人参皂苷酶最佳反应条件进行了研究,结果表明：转基因酶Ⅲ型人参皂苷酶在PH为7的磷酸钠盐缓冲液中保持最大活性,最佳反应温度为37℃-45℃。在3h内能将0.5%底物浓度Rbl完全分解生产Gypl7,然后能继续分解Gyp17进一步生成Gyp75。底物最适合溶解在带有甘油的磷酸钠盐缓冲液中,且24小时反应Rbl最佳底物浓度为2%。转基因酶Ⅲ型人参皂苷酶可以水解原人参二醇类皂苷(PPD皂苷)的3-O-葡萄糖基,水解人参皂苷Rbl成为Gyp17且进一步水解Gyp17成为解Gyp75；转基因酶水解人参皂菅Rb2成为C-O,进一步水解成C-Y.。能够水解人参皂苷Re成为C-Mc1,进一步水解成C-Mc。它也能水解人参皂苷Rd成为F2,进一步水解成C-K。在最佳反应条件基础上进行反应,4g Rbl经酶反应得到Gyp173.12g,得率为78.0%；2g Rc经酶反应得到C-Mcl 1.30g,得率为65.0%。转基因酶Ⅲ型人参皂苷酶在最佳反应条件下反应了24h,由于反应时间相对较短,只水解掉了此键位的一个Glc,生成了较纯的产物Gyp17和C-Mc1。随着时间的延长3-0-的Glc会被继续水解生成Gyp75和C-Mc,我们可以根据实际需要,来控制反应条件和反应时间来得到理想的目的产物。