拮抗放线菌CT205分离鉴定及其对黄瓜枯萎病的生防效应研究

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黄瓜枯萎病是由尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum f. sp. cucumerinum)引起的一种土传病害,严重影响黄瓜的产量与品质。然而,目前尚无理想的药剂对黄瓜枯萎病进行防治,一些农艺管理措施只能起到局部的控制作用,生物防控具有高效、低毒、安全等特点,是环境友好型的防控方法,对于维持生态平衡及农业可持续发展具有重要意义。本文从南京紫金山麓土壤中分离出4株放线菌,分别为A01、B01、B04、CT205,复筛获得抗菌谱广泛、抗性较强的拮抗放线菌CT205。以拮抗放线菌CT205为材料,首先对菌株进行分类鉴定,然后通过盆栽试验和田间试验探究拮抗放线菌CT205及其与有机肥制成的生物有机肥对黄瓜枯萎病的生防效应。研究结果如下:从土壤中分离出拮抗放线菌A01、B01、B04、CT205,经比较研究发现菌株CT205抗菌谱广泛且抗菌活性强。菌株CT205对小麦纹枯病原菌(Rhizoctonia cerealis)、黄瓜枯萎病原菌(F. oxysporum f. sp. cucumerinum)、烟草疫霉病原菌(Phytophthora parasitica var. nicotianae)等植物病原菌均具有较强的抑制作用,其发酵上清液原液对香蕉根结线虫也有抑制作用,香蕉根结线虫的校正死亡率达95%。菌株CT205与黄瓜枯萎病原菌进行对峙培养镜检发现,病原菌的边缘菌丝形态发生明显变化,菌丝体中的隔膜变多,并伴随着褶皱;菌丝顶端肿大膨胀,有原生质体渗漏。经过形态特征、培养特征、生理生化特征及16S rRNA序列分析,初步鉴定菌株CT205为白刺链霉菌(Streptomyces albospinus)。两次盆栽试验结果表明,单独施用拮抗菌CT205对黄瓜枯萎病的防治效果分别为18.8%和51.9%,两次防治效果差异大的原因为第一次盆栽试验时放线菌CT205菌悬液与土壤拌匀进行试验,而第二次盆栽试验时菌悬液以灌根的方式加入到土壤中。施加生物有机肥对黄瓜枯萎病的防治效果可达到83.6%和81.9%。施用生物有机肥对黄瓜有促生作用,植物过氧化物酶(POD)活性值为35.68U g-1min-1,比对照显著增加了130.6%,该处理的土壤脲酶及蔗糖酶活性分别比对照增加了26.8%、29.2%。用平板计数法测定土壤微生物数量变化,并结合PCR-DGGE分析可知,施加生物有机肥使根际土壤中的放线菌数量增加而尖孢镰刀菌数量减少,细菌数量与对照相比有所下降但其细菌多样性增加,真菌数量比对照少而其真菌多样性也减少。田间试验结果表明,生物有机肥处理对黄瓜枯萎病的防控效果达到55.6%。施用生物有机肥后,黄瓜植株叶片的株高、茎粗比对照分别增加49.3%、12.8%,该处理的黄瓜产量达到5.5×103kg·亩-1,比对照增加了41.2%。生物有机肥处理的土壤脲酶及蔗糖酶活性与对照相比增加。发病植株与健康植株根际土的微生物数量发生变化,改善了土壤的微生物群落结构。
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