【目的】分离纯化人自然杀伤T细胞(natural killer T cell，NKT细胞)并应用流式细胞仪对其表型进行分析，研究NKT细胞与树突状细胞(dendriticcell，DC)联合应用在抗肿瘤免疫中的作用，并初步探讨其机制。【方法】常规无菌采集新鲜外周血，密度梯度离心法分离出外周血单个核细胞(peripheralblood mononuclear cells，PBMC)，在细胞因子(IL-4+GM-CSF+TNF-α)的作用下定向诱导培养并扩增DC(dendritic cell)，同时进行相应的表型分析；采集并分离不同个体外周血T细胞与树突细胞共同培养扩增NKT细胞，采用流式细胞术进行相应的表型分析，观察其对人肺腺癌细胞系AGZY83-a、Anip973的杀伤作用。【结果】从人外周血分离到的PBMC经共同培养后，第10d光镜下即可见具有典型形态结构的DC，细胞表型检测见高表达CD1a、CD80、CD86，以及成熟的CD83表面标志。实验显示，DC能成功诱导NKT细胞增殖并活化，低DC浓度刺激组NKT增殖程度是对照组的0.82倍；中DC浓度刺激组NKT增殖程度是对照组的1.49倍；高DC浓度刺激组NKT增殖程度是对照组的2.15倍，以上表明，随着树突状细胞与NKT细胞比例的增大，NKT细胞的增殖能力逐渐增强。同时结果还显示，当DC与NKT细胞的比例为10：1和20：1时，其刺激NKT细胞增殖的能力强于细胞因子刺激组。应用本试验方法培养出的DC可以有效的激活正常健康人外周血的NKT细胞并促进其增殖，增强NKT细胞的细胞毒作用。当效：靶为5：1时，NKT细胞对AGZY83-a肿瘤细胞的细胞毒作用为16.9％±12.4，对Anip973肿瘤细胞的抑制率为19.6±13.8％；当效：靶为10：1时，NKT细胞对AGZY83-a肿瘤细胞的抑制率为38.8±9.6％，对Anip973肿瘤细胞的抑制率为52.8±9.4％；当效：靶为20：1时，NKT细胞对AGZY83-a肿瘤细胞的抑制率为71.6±11.2％，对Anip973肿瘤细胞的抑制率为80.3±8.0％。以上表明，NKT细胞的抗肿瘤活性随着效靶比例的不断升高而增大，并且相同浓度NKT细胞对Anip973肿瘤细胞的杀伤活性强于AGZY83-a。【结论】1．人外周血PBMC在IL-4+GM-CSF+TNF-α的作用下可以定向诱导为DC。2．DC具有体外刺激NKT细胞扩增的能力，并且可以有效的激活NKT细胞发挥抗肿瘤作用。3．NKT细胞对Anip973的杀伤活性较强，可能对肿瘤转移起到抑制作用。