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研究目的蚯蚓是环节动物门寡毛纲陆生动物,其活性成分具有活血化瘀、促进愈合、溶栓降压、抗菌消炎止痛、平喘止咳、增强免疫力、抗氧化、抗肿瘤等效果,其中蚯蚓抗氧化酶(EE)具有明显的抗氧化效果。本实验为了探明EE的抑瘤效果,利用S180小鼠腹水瘤细胞进行体外抑瘤实验;通过对小鼠接种S180细胞产生可移植性瘤进行体内抑瘤实验。研究方法EE提取:通过研磨、超声波破碎、超滤、凝胶过滤层析等方法提取EE。体外抑瘤:通过培养S180腹水瘤细胞在倒置显微镜和荧光显微镜下观察其细胞形态;通过MTT法检测不同浓度和作用时间的EE对S180细胞的抑制效果。体内抑瘤:通过接种S180细胞产生可移植肿瘤法进行体内抑瘤试验,观察EE的体内抑瘤效果;检测与机体抗氧化能力(T-AOC、MDA).肿瘤相关的血清酶活力及相关免疫指标;从组织形态学,DNA梯状条带,免疫组化观察Bax、Bcl-2表达三个方面研究EE诱导肿瘤细胞凋亡的作用及机理。研究结果EE提取:SOD比活力为3845.27U/mg,酶浓度为0.038mg/ml;CAT的比活力为1158.48U/mg,酶浓度为0.024mg/ml;EE的酶浓度为6.39mg/ml。体外抑瘤实验:显微镜下观察可见肿瘤细胞凋亡,细胞质浓缩、凝固、细胞核碎片化,出现凋亡小体;MTT试验结果:蚯蚓SOD、CAT、EE低、高剂量作用24h的抑瘤率分别为:31.37%、35.49%、27.07%、29.68%、38.93%、39.87%。蚯蚓SOD、CAT、EE低、高剂量作用48h的抑瘤率分别为39.25%、41.74%、31.65%、33.47%、39.27%、42.28%。体内抑瘤实验:与对照组相比,不同浓度EE处理的药物组的免疫器官指数均有明显的提高。预防高、中、低剂量组和治疗高、中、低剂量组的LDH、CAT、GSH-PX、T-AOC、MDA均与对照组差异显著;EE实验组的肿瘤中可见凋亡细胞,DNA梯状条带明显,Bax与Bcl-2的比值升高。结论S180细胞体内、外试验证明EE有一定的抑瘤效果,且抑瘤率与剂量呈正相关,高剂量组抑瘤效果较为显著,在改善荷瘤小鼠的免疫功能、增强抗氧化能力,显著降低LDH的活力,提高SOD、CAT、GSH-PX的活力等方面效果显著。诱导肿瘤细胞凋亡为蚯蚓抗氧化酶抑瘤机理之一。