芹叶铁线莲化学成分及同属铁线莲HPLC指纹图谱、总皂苷提取工艺研究

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铁线莲属Clematis L.隶属于毛茛科,全世界约有355种,广泛分布于除南极洲以外的各大洲。我国约有150种,各地均有分布。内蒙古地区有16种6变种,经本草考证,其中入蒙药的植物有:芹叶铁线莲C.aethusifolia、黄花铁线莲C.intricata、长瓣铁线莲C.macropetala、短尾铁线莲C.brevicaudata、棉团铁线莲C.hexapetala和辣蓼铁线莲C.mandshurica(又名:东北铁线莲)。芹叶铁线莲又名细叶铁线莲,被收载于《内蒙古植物药志》、《卫生部药品标准·蒙药分册》,常以全草入中药,带花、叶枝条入蒙药,具有祛风除湿、通络止痛之功效。本课题采用反复硅胶柱色谱,凝胶(Sephadex LH-20)柱色谱分离技术,对采自内蒙古呼和浩特的芹叶铁线莲全草乙醇提取物进行系统的化学成分研究,共分离得到11个单体化合物,运用现代波谱分析技术(MS、1H-NMR、13C-NMR)鉴定了7个单体化合物的结构。其分别为槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(1)、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷(2)、芹菜素-7-O-(6″-对位香豆酰基)-β-D-葡萄糖苷(3)、丹参素甲酯(4)、豆甾醇(5)、胡萝卜苷(6)、棕榈酸(7)。其他未鉴定的化合物包括1个黄酮类化合物、2个长链脂肪酸脂、1个烷醇。采用高效液相色谱法,以内蒙古地区10批芹叶铁线莲药材作为测定样品,以标示的27个共有峰为评价指标,建立了芹叶铁线莲HPLC指纹图谱。结果表明10批芹叶铁线莲药材相似度均大于0.90。此方法具有良好的精密度、重复性和稳定性,适用于芹叶铁线莲药材的鉴别及质量控制。将芹叶铁线莲HPLC指纹图谱与其余5种铁线莲药材高效液相色谱图进行比较,发现在化学成分的种类和含量上存在较大差异。对产自内蒙古地区的5种铁线莲属蒙药材,采用响应面法优化总皂苷的超声提取工艺。选用乙醇为提取溶剂,以乙醇浓度、料液比、提取时间为自变量,总皂苷得率为响应值,优化总皂苷的提取工艺参数。利用Design-Expert 8.0软件进行数据分析,建立二次多项回归模型,模型拟合程度较高,模型P值均小于0.001,达极显著水平,失拟项均不显著,除黄花铁线莲回归方程R2=0.98,其余药材均大于0.99。
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