天然抗氧化剂的制备及对模拟大气环境抗自由基活性研究

来源 :兰州理工大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:ALFU
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本文以黄芩茎叶为原料,经酸沉碱提、酸解、纯化等条件的筛选,研究野黄芩素提取纯化的最佳工艺条件,并以野黄芩素为代表物进一步探索具有代表性黄酮结构的天然抗氧化剂的制备纯化工艺路线;通过电化学方法研究天然抗氧化剂(槲皮素、儿茶素、木犀草素、野黄芩素、黄芩素、染料木素、金丝桃素、抗坏血酸、秦皮苷、水杨酸)对4种自由基(羟基自由基、脂质过氧自由基、DPPH及超氧自由基)的抗氧化活性;筛选出抗氧化活性强、分子结构相近的天然抗氧化剂,应用于对模拟大气环境中自由基的作用,研究其对模拟大气环境中自由基的抗氧化活性,并进一步探讨天然抗氧化剂抗氧化活性与结构之间的关系,具体研究工作如下:1、从中药黄芩茎叶中经碱提酸沉、甲醇重结晶等工艺提取出野黄芩苷,通过单因素实验和正交实验筛选出由野黄芩苷酸解制备野黄芩素的最佳工艺条件即:硫酸浓度20%、酸解温度110℃、料液比1:80、酸解时间5h。在此条件下,野黄芩素得率为72.57%,纯度为45%;通过对野黄芩素纯化工艺研究,开发了一条野黄芩素萃取纯化的工艺路线,即石油醚萃取3次,再经乙酸乙酯萃取3次,萃取剂倍量为1:3(沉淀V/萃取剂V),所得萃取物干燥后,再经甲醇结晶3次,所得产物野黄芩素平均含量为90.28%;通过研究天然抗氧化剂野黄芩素的制备工艺,进一步探索普遍适用于天然抗氧化剂的提取、分离、纯化制备工艺路线和生产技术。2、采用电化学方法研究了野黄芩素、黄芩素、槲皮素、儿茶素、木犀草素、染料木素、金丝桃素、抗坏血酸、秦皮苷、水杨酸等天然抗氧化剂对羟基自由基、脂质过氧自由基、DPPH自由基及超氧自由基的抗氧化活性,实验结果如下:(1)羟基自由基:槲皮素(IC50,0.055)>金丝桃素(IC50,0.057)>儿茶素(IC50,0.067)>木犀草素(IC50,0.071)>野黄芩素(IC50,0.072)>黄芩素(IC50,0.084)>染料木素(IC50,0.093)>水杨酸(IC50,0.104)>抗坏血酸(IC50,0.114)>秦皮苷(IC50,0.135);(2)DPPH自由基:槲皮素(IC50,0.062)>金丝桃素(IC50,0.071)>儿茶素(IC50,0.076)>木犀草素(IC50,0.078)>野黄芩素(IC50,0.081)>抗坏血酸(IC50,0.086)>黄芩素(IC50,0.093)>染料木素(IC50,0.099)>水杨酸(IC50,0.114)>秦皮苷(IC50,0.120);(3)超氧自由基:槲皮素(IC50,0.059)>金丝桃素(IC50,0.069)>儿茶素(IC50,0.074)>木犀草素(IC50,0.079)>野黄芩素(IC50,0.084)>抗坏血酸(IC50,0.090)>黄芩素(IC50,0.093)>水杨酸(IC50,0.104)>染料木素(IC50,0.119)>秦皮苷(IC50,0.127);(4)脂质过氧自由基:金丝桃素(IC50,0.059)>槲皮素(IC50,0.064>抗坏血酸(IC50,0.067)>野黄芩素(IC50,0.071)>木犀草素(IC50,0.076)>儿茶素(IC50,0.084)>黄芩素(IC50,0.086)>水杨酸(IC50,0.094)>秦皮苷(IC50,0.096)>染料木素(IC50,0.102);3、通过研究10种天然抗氧化剂对4种自由基的清除活性,筛选出具有抗氧化活性强、分子结构相近的天然抗氧化剂,并采用电化学法及分光光度法研究其对模拟大气环境中自由基的清除活性,实验结果为:槲皮素(IC50,0.039)>金丝桃素(IC50,0.040)>儿茶素(IC50,0.048)>木犀草素(IC50,0.049)>野黄芩素(IC50,0.065)>黄芩素(IC50,0.078)>染料木素(IC50,0.130);研究表明天然抗氧化剂抗氧化活性与其结构密切相关,其中酚羟基是抗氧化的必要基团,其次分子结构中羟基化程度、羟基的数目与位置、C环饱和度以及化合物的空间结构,均是影响抗氧化活性的重要因素。
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