前言：虽然辅助化疗和新辅助化疗的应用，改善了骨肉瘤的预后，但高转移率仍是治愈该病的困难所在。传统化疗存在化疗耐药等问题，近年来抗肿瘤血管生成治疗研究迅速发展，虽然尚有许多潜在的问题待解决，但提供了一条有希望治愈肿瘤的新途径。抗肿瘤血管生成治疗的前景：(1)研究发现虽然在分子水平上肿瘤血管内皮细胞区别于正常内皮细胞，但各种肿瘤的血管内皮细胞是相似的。抗血管生成剂可有很广的抗瘤谱。(2)抗血管生成剂的作用靶点是内皮细胞，通常稳定、为二倍体，而不象肿瘤细胞易于突变形成耐药性。(3)化疗作用依赖于药物的渗透，对于少血供的肿瘤疗效就差。而血管内皮细胞易于接触血循环中的药物。(4)许多试验表明副作用可以接受，且与化疗药无毒性叠加，因为这类药为细胞稳定剂，而非细胞毒性剂。抗血管生成治疗基于以下策略：1)阻断血管增生因子、受体、或传导通路；2)上调或产生内源性抑制剂；3)直接作用于肿瘤血管。血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases，MMP)是抗血管生成治疗的两个重要靶因子。已有许多研究表明MMPs(尤其是MMP-2、MMP-9)、VEGF与肿瘤的恶性侵袭和转移有关。有关骨肉瘤的研究甚少，尚无在骨肉瘤中关于VEGF与MMP-2、MMP-9的相关性研究报道。 P．：罗t汐 一．…。，、．丛一ho 一 硕士学位论文 瓦s厂 目的：探讨骨肉瘤MMP－2、MMP－9与VEGF表达的相关性及其对预后的影响， 为抗血管生成治疗在骨肉瘤患者中应用提拱依据。 方法：采用兔疫组织化学技术对56例不同临床行为的骨肉瘤活检组织和8例转移 灶组织进行了VEGF、MMP－2、MMP－9表达的检测。本研究选用浙江大学医学院 附属H院 1994年 IR～2000年 12月期间收治的肢体＊B期骨肉瘤活检标本 56例， 并另有8例转移灶标本；其中男性34例、女性22例；年龄9—43 岁、中位年龄18 岁；股骨下端 28例、胚骨上端 12例、胖骨上端 5例、股骨上端 2例、肽骨上端 8例和腔骨下端1例：成骨细胞型28例、成软骨细胞型11例、成纤维细胞型8 例和其它类型9例；保肢37例，截肢19例。 免疫组化染色采用SP法，MMP－2、MMP－9仅作定性分析，大于5％细胞 阳染界定为阳性，＊＊OF作半定量分析，阳染率小于10％为阴性（－），＞10％且＜50％ 为弱阳性（＋），＞50％且＜80％为阳性（＋＋），Z80％为强阳性（＋＋＋）。用己知乳腺 癌转移淋巴结MMP－2染色阳性切片、乳腺癌转移淋巴结MMP－9染色阳性切片和 结肠癌VEGF染色阳性切片分别作MMPZ、MMP－9、VEGF的阳性对照；用 PBS分别代替第一抗体作阴性对照。SPSS 10．0统计软件作统计学处理。 结果：56例患者随访时间13～gi个月，中位时间47月；其中无瘤生存26例， 复发同时肺转移1例，软组织转移2例，骨转移1例，肺转移26例。三年无瘤生 存率50．3％，五年无瘤生存率38．8％。 l、MMP－2表达 MMP－2表达阳性的肿瘤细胞常聚集成团而成灶性分布，或分布于肿瘤灶的边。缘。MMP－2 表达阳性率为 53．6％；阳性组五年无瘤生存率（disease free ＊＊＊v1v＊1，OFS）为17．0％：阴性组五年OFS为69．2％。两组生存率经1。g－＊＊uk检 验有显著统计意义（p＝0．0012）。MMP－2表达与肿瘤大小经Kendall 等级相关 分析无统计意义。 2、MMP－9表达 2 pei罗i 4 一．．－ho 硕士学位论文 飞羹歹 MMPg表达阳性的肿瘤细胞分布与MMPZ类似；阳性率为53．6％；阳性组 五年无瘤生存率为23．9＄：阴性组五年DFS为59．8％。两组生存率经二。g－Y8llk检 验有显著统计意义（p＝0．0049）。MMP－9表达与肿瘤大小经 Kendal 等级相关分 析无统计意义。 3、VEGF表达 VEGF表达阴性卜）14例、弱阳性（＋）13例、阳性卜＋）14例、强阳性（＋＋＋）15 例。把阴性和弱阳性界定为低表达组，共27例，生存17例，五年DFS为57．5％； 阳性和强阳性界定为高表达式组，共29例，生存9例，五年DFS为24．l％。两组 生存率经 log－rank检验有统计意义（p＝0．0322）。 4、骨肉瘤原发灶与转移灶的MMP－2、MMP－9、VEGF表达 骨肉瘤转移灶中MMP－2、MMP－9、VEGF表达阳性率较高，且同一病例原发 灶与转移灶的表达有良好一致性。 5、MMPZ、MMPg与VEG