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研究背景 体外循环心肺转流(Cardiopulmonary Bypass，CPB)系非生理性灌注，心内直视手术体外循环后易引起免疫抑制，术后免疫功能降低易导致各种感染性并发症。 CPB后T淋巴细胞数量上显著减少，尤其是辅助性Th细胞持续低下，而杀伤性Tc细胞升高。Th/Tc比例下降是细胞免疫调节受损的表现。国内外学者的研究表明体外循环术后T淋巴细胞功能受到抑制，但患者活化T淋巴细胞在CPB期间的变化规律以及影响因素尚不清楚。 CD69是已知的T淋巴细胞激活以后最早表达的一个膜抗原，是T淋巴细胞活化的标记抗原；人类白细胞抗原DR位点(HLA-DR)的表达则被作为晚期(刺激后2-4天)T淋巴细胞活化的指标。近年来，随着免疫学的进展，可通过流式细胞仪(FCM)测定各类免疫活性细胞的表面活化抗原的变化来了解CPB对机体活化T细胞的影响。 研究目的 探讨小儿体外循环心内直视手术围术期外周血T淋巴细胞表面活化分子CD69、HLA-DR的变化规律及意义。从T淋巴细胞活化的角度研究CPB术后免疫功能受到抑制的原因，找到一种较好的、敏感的术后细胞免疫功能检测指标，降低术后感染的发病率，具有一定的研究价值和临床应用价值。一研究对象 体外循环组：随机选择2001年8月一2001年12月在浙江大学附属儿童医院行体外循环手术的先天性心脏病（congenital heart disease，CHD）患儿42例，男性20例，女性22例，年龄2月一13岁，平均4．74土3．33岁，体重5．0—41Kg，平均16．39士8．02 Kg。非体外循环组：随机选择 2001年 8月一2001年 12月在浙江大学附属儿童医院行非体外循环普胸手术患儿 11例，男性 8例，女性 3例，年龄 0．5月一 10岁，平均4．ZO土3．58岁，体重5一27Kg，平均15．05土7．91Kg。两组患儿术前均未使用免疫抑制剂，无感染性及免疫性疾病。两组患儿性别、年龄、体重无显著性差异。研究方法 体外循环组患儿分别于手术前1天、术中（转流后30分钟）、术后lh、术后24h、术后48h、术后72h共6个时点分别采集外周新鲜全血2 ml，肝素钠 0．lml抗凝；普胸患儿分别于手术前 1天、术后 lh、术后 24h共 3个时点采集外周新鲜全血 2 ml，肝素钠 0．lml抗凝；采用流式细胞仪（FACSCalibur－，美国 BeCton Dickinson公司）Cell QuestW软件检测 CD69＋T淋巴细胞（CD3＋／CD69＋）和皿A－DR＋T淋巴细胞 （CD3＋／HLA－DR＋）的百分率。采用SPSS for windo。s 10．0版本进行数据统计分析。结 果互．体外循环组与非体外循环组患儿术前活化T淋巴细胞无显著性差异（t二1．143 and 0．649，HO．05），非体外循环组患儿手术前后活化T淋巴细胞无显著性变化 （F＝0．761 and 0．754，HO．05）；2．体外循环组患儿转流中即可见m3＋／CD69＋表达增加（．43士0．68 VS．10士0．50， HO．022），术后 lh达最高峰（2．03士0．88 VS．10士0．50，尸＜0．001），术后 72h 恢复至术前水平（1．14士0．49 vs．10士0．50，尸功．739），CD3＋／HLA－DR＋抗原 的表达率在术后 lh开始增高（3．59上1．45 VS 2．75士1．35，尸＝0．009），术后 48h 2 浙江大学硕士学位论文 中文摘要 即恢复到术前水平（3．01士1．62 vs 2．75士1．35，尸二0．411），术后 72h低于术前 水平（2．33士1．41 vs 2．75士1．35，尸二0．047）；3．42例体外循环组患儿术后3天内发生感染10例。感染组患儿术后lh的CD3＋／CD69＋ 较非感染组明显升高（2．52士0．85 VS．88士0．84，t＝2．114，peo．041＜0．05），两 组患）LCD3＋／HLA－DR＋的表达率在围术期各时点无显著性差异（NO．05）；4．使用Spearman相关分析法就感染与否与术后lh的CD3＋／CD69＋的表达率进行相关 分析，Spearman相关系数r＝0．327，peo．034＜0．05，说明术后lh的CD3＋／CD69＋ 的数值越高，感染的可能性越大。其他时点的CD3＋／CD69＋、CD3＋／HLA－DR＋表达率 与感染的相关系数无显著性意义；5．主动脉阻断时间＞40min组术后 lh CD3＋／CD69＋的表达率较主动脉阻断时间＜40min 组明显升高（2．45士 0．76 VS．83士 0．87，t二2．267，HO．029＜0．05），年龄、疾 病种类、氧合器、主动脉阻断时间、激素用量、有无超滤、术后输血量以及术后 呼吸机使用时间等因素对CD3＋／HLA－DR＋的表达无影响。结 论1．体外循环心内直视手术可影响机体的T淋巴细胞的活化功能，早期T淋巴细胞 活化分子CD3＋／CD69＋表达增强，晚期活化分子CD3＋／HLA－DR＋表达受到抑制；2．CD3＋／CD69＋在术后早期异常升高与术后感染的发生有关；3．主动脉阻断时间过长是导致CD3VC069＋术后升高的主要原因：4．CPB术后早期T淋巴细胞活化功能增强是导致术后细胞免疫功能障碍原因之一， 外周血T淋巴细胞表面HLA－DR表达异常并不会引起术后细胞免疫功能障碍。