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花叶艳山姜(Alpinia zerumbet’Variegata’)是一种良好的芳香及观赏植物,叶片具有特殊香气。本项目以花叶艳山姜叶片为材料,对其精油提取、化学成分、抗氧化活性、抗菌活性、群体感应抑制活性和有效成分分离纯化等方面进行了深入研究。主要研究结果如下:1花叶艳山姜叶片精油提取工艺优化采用不同方法萃取花叶艳山姜叶片精油,并分别优化出试验范围内的最佳工艺参数。水蒸气蒸馏法(HD)的最佳工艺为蒸馏时间1.5 h、料液比1:6、浸泡时间30 min和氯化钠浓度1.5%,在此条件下得率为0.216%。有机溶剂萃取法(PEE)的最佳工艺参数为:萃取溶剂为石油醚,萃取时间4 h、料液比1:6.5、萃取温度50℃,在此条件下得率为0.340%。超临界-C02萃取法(SCE)的最佳工艺为萃取时间2 h,萃取压力25 MPa,萃取温度30℃和C02流量15.5 L·h-1,在此条件下花叶艳山姜叶片精油萃取得率为1.40%。结果表明,三种方法中SCE法优化出的精油得率最高。2花叶艳山姜叶片精油成分分析采用GC-MS对不同方法萃取的花叶艳山姜叶片精油进行成分分析,分别从HS-SPME、HD、PEE和SCE中鉴定出60、31、28和33种化合物。HP-SPME中的主要成分是1,8-桉叶油醇(43.50%)、对伞花烃(11.26%)、芳樟醇(5.74%)、蛇麻烯(5.02%)、樟脑(4.69%)、反式-肉桂酸甲酯(3.23%)、γ-杜松萜烯(3.13%)、甲基丁香酚(2.76%)、蛇麻烯环氧化物Ⅱ(1.89%)和α-松油醇(1.82%)等。HD中主要成分为1,8-桉叶油醇(51.52%)、对伞花烃(11.26%)、樟脑(5.74%)、右旋柠檬烯(3.86%)、蛇麻烯环氧化物Ⅱ(3.63%)、α-蒎烯(3.33%)、樟烯(3.32%)和反式-肉桂酸甲酯(2.38%)等。PEE萃取精油的主要成分是二氢-5,6-去氢卡瓦胡椒素(DDK,60.00%)、1,8-桉叶油醇(15.50%)、樟脑(3.11%)、对伞花烃(2.25%)、反式-肉桂酸甲酯(2.07%)和石竹烯氧化物(1.07%)等。SCE萃取的花叶艳山姜叶片精油主要成分为DDK(51.55%)、1,8-桉叶油醇(8.48%)、甲基丙烯酸月桂酯(7.45%)、鲸蜡烯(3.99%)、樟脑(2.68%)、水菖蒲烯氧化物(2.56%)、反式-肉桂酸甲酯(2.21%)、蛇麻烯(1.90%)、α-桉叶醇(1.62%)和对伞花烃(1.09%)等。HS-SPME和HD中萜类化合物含量最高,而PEE和SCE中芳香族化合物含量最高,四种方法中脂肪族含量均最低。3花叶艳山姜叶片精油抗氧化活性采用多种测定方法对花叶艳山姜叶片精油抗氧化活性进行研究,结果表明SCE和PEE萃取的花叶艳山姜叶片精油具有很强的抗氧化活性,酚类化合物和萜类化合物可能是其具有抗氧化活性的原因。HD. PEE和SCE三种方法所萃取的花叶艳山姜叶片精油总酚含量分别为2.04、5.72和13.91μg GA/mg。从IC50值来看,PEE在清除超氧阴离子自由基中能力最强。而在清除DPPH自由基、还原力和抗脂质过氧化方面,SCE效果最好。4花叶艳山姜叶片精油抗菌活性采用抑菌圈、MIC和MBC等方法对花叶艳山姜叶片精油抗菌活性进行测定,结果显示其对供试的6种细菌均有抗菌活性,但不同萃取方法所得精油对不同细菌的抑制效果不同。HD、PEE和SCE对枯草芽孢杆菌的抑制效果最好,具有最小的MIC和MBC。从MIC判定抗菌效果,对金黄色葡萄球菌抑菌效果最好的是PEE和SCE,PEE对枯草芽孢杆菌抑制效果最强,HD对粘质沙雷氏菌MG1抑菌效果优于PEE和SCE,而三者对大肠杆菌、铜绿假单胞杆菌和粘质沙雷氏菌H30的抑制效果相当。5花叶艳山姜叶片精油抑制细菌群体感应活性花叶艳山姜叶片精油对野生型紫色杆菌和改造型紫色杆菌CV026既有抑菌圈也有群体感应抑制圈,而且还能部分降低紫色杆菌CV026产生紫色杆菌素的产量。这种抑制效果一方面来源于对细菌生长的影响,另一方面来源于对细菌群体感应的抑制作用,其中抑制效果较好的是SCE和PEE。在抑制细菌群集运动方面,SCE对三种供试细菌群集运动抑制效果都最优,PEE对两种粘质沙雷氏菌的群集运动抑制效果优于HD,而对铜绿假单胞杆菌的抑制效果弱于HD。6花叶艳山姜叶片精油抑制细菌群体感应活性成分分离纯化及鉴定以细菌群体感应抑制活性进行活性追踪,对SCE和PEE法萃取的花叶艳山姜叶片精油进行分离,分别获得主要活性化合物1和2。并通过GC-MS、核磁共振技术等方法鉴定化合物1和2为同一物质,该化合物为DDK。