人有五种基本味觉，甜、咸、苦、酸和鲜。其中苦味是人味觉中最为敏感的一种，对口服制剂的发展有着重要的影响。尤其是在儿童用药领域，考虑到儿童患者对药物苦味的敏感性和接受性，苦味已经成为儿童口服制剂能否取得市场成功的关键因素。因此，开发出可口的药物，发展苦味掩盖技术是目前制药行业投资的热点之一。苦味评价作为掩味处方的一个重要质控参数具有重要的研究意义。　　随着掩味技术的发展，苦味评价技术也取得了一定的进展。从传统的人群口感实验、动物电生理研究方法、动物偏好性实验到体外溶出以及最新的生物电子舌系统，苦味评价技术经历了从主观到客观，定性到定量，低通量到高通量的转变。目前为止，最常用的苦味评价方法为人群口感实验，这种评价方法传统直观，但检测范围与结果的准确性受限于样品的潜在毒性以及受试者的个体差异。电子舌作为最新的评价手段具有客观、重复性好、检测快速等优点，但它实际感知的是苦味溶液离子强度、电信号等物理性质的变化，不能真正反映苦味的生理过程。　　本文致力于构建一种基于苦味感知的高通量苦味评价细胞平台。目前发现人的苦昧受体(T2R)共有25种，它们均属于七次跨膜的G蛋白偶联受体超家族(GPCR)。由苦味传导机制可知，当苦味物质和受体蛋白相互作用时，与苦味受体协同作用的G蛋白被活化，进而激活依赖于Gα和Gβ、Gγ蛋白的细胞内信号传导通路，使得细胞内的钙离子浓度升高。模拟这种传导机制，首先利用转染技术构建感知苦味的细胞平台。选择人第46号苦味受体(T2R46)作为研究对象，并对其质粒进行定向改造，加入一段牛视紫红质(BR)膜定位序列。随后将构建成功的T2R46-BR质粒与Gα质粒共同转染HEK293细胞，当使用不同的苦味物质刺激转染细胞时，通过钙成像技术检测细胞内钙离子浓度的实时变化，最终达到苦味评估的目的。然而由于转染技术的局限，使得依赖于钙成像技术构建的苦味评价平台检测效率不高。因此，通过提取动物气管平滑肌细胞上的苦味受体构建起“气管味蕾”平台，本文利用钙成像技术对此平台进行了细胞水平的验证。