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猪繁殖与呼吸综合征（Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome,PRRS）是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus,PRRSV）引起一种猪的重要传染病,如何有效地控制该病流行是当前面临的严峻挑战和重大课题。在调查分析云南省部分地区猪场PRRSV流行情况和基因遗传进化的基础上,进一步通过细胞实验和动物实验评价中药“黄氏蓝瘟康”抑制PRRSV增殖效果及作用机制,并在实验猪场对PRRS防治措施进行应用效果评价,以期为该病防控提供理论依据。研究结果如下:1、2013-2018年间,对云南省不同地区规模猪场收集的2234份样品进行疫病检测,发现594份样品为PPRSV阳性,阳性率为26.59%。阳性样品中,二重混合感染率为38.72%,三重混合感染率为11.11%,四重混合感染率为1.35%;其中PRRSV、猪圆环病毒Ⅱ型（PCV2）和猪瘟病毒（CSFV）三重混合感染率为6.06%;PRRSV、PCV2和伪狂犬病毒（PRV）三重混合感染率为3.37%;PRRSV、PCV2、CSFV和PRV四重混合感染率为1.68%。将部分阳性病料通过Marc-145和PAM细胞进行病毒分离与鉴定,分离得到20株云南PRRSV流行毒株,并完成病毒感染力(TCID50)测定。2、将获得的20株PRRSV云南流行毒株进行全基因组测序,发现全基因序列长度在15230 bp到15437 bp之间,与JXA1毒株的核苷酸同源性最高,为93.3%99.1%。遗传进化分析表明,20株PRRSV云南毒株均属于国内优势流行毒株sublineage8.7谱系,其中6株云南毒株形成一个独立分支,介于subgroupⅠ和subgroupⅡ之间,属于Intermediate亚群;6株毒株和subgroupⅢ亲缘关系较近,属于高致病性JXA1-like毒株亚群;8株毒株和subgroupⅤ亲缘关系较近,属于HP-PRRSV vaccine-like亚群。与参考毒株相比,部分关键氨基酸位点存在不同程度的突变和缺失。3、以Marc-145细胞为模型,体外评价中药“黄氏蓝瘟康”对PRRSV的抑制作用,结果表明药物最大无毒浓度（TC0）为1.56 mg/ml,半数毒性浓度(TC50)为38.3 mg/ml。中药通过治疗、预防和直接抑制三种给药方式均能抑制病毒增殖,半数抑制浓度(IC50)分别为0.265 mg/ml、0.300 mg/ml和0.282 mg/ml,选择指数（SI）分别为144.53、127.67和135.82,能够使病毒毒力(TCID50)下降2个滴度以上,以治疗作用方式给药效果最佳。实时荧光定量PCR检测结果表明,药物三种作用方式均显著抑制了PRRSV核蛋白基因（ORF7）的表达,间接免疫荧光实验进一步证明PRRSV核蛋白表达被抑制。中药对NF-κB信号通路相关蛋白表达变化的结果表明,“黄氏蓝瘟康”能够抑制NF-κB信号通路相关蛋白p-IκBα、p-p65、整合素β3和RACK1蛋白表达。动物实验发现,中药治疗组临床症状评分低于接毒对照组,中药治疗组肺组织PRRSV ORF7基因和N蛋白表达明显低于接毒对照组;组织病理学观察发现,中药治疗组肺脏病理变化相对于接毒组病理变化较轻;免疫组织化学实验表明,中药治疗组中所有仔猪的肺部PRRSV阳性信号显著低于接毒对照组。4、应用以中药“黄氏蓝瘟康”为主要的临床防控措施一年后,三个实验场疫苗免疫抗体水平相对于实施前得到显著提高,其中PRRSV免疫合格率上升28.04%;CSFV免疫合格率上升17.48%,PRV免疫合格率上升15.89%。四种疫病阳性率相对于实施前显著下降,其中PRRSV总阳性率下降6.65%,CSFV总阳性率下降6.35%,PCV2总阳性率下降10.64%,PRV总阳性率下降3.03%。母猪平均产仔数为11.8头/胎,相对于实施前提高0.43头/胎,平均窝产活仔数为10.5头/窝,相对于实施前提高1.57头/窝,仔猪断奶成活率为93.38%,相对于实施前提高11.61%。A场经综合措施防控后,生猪疫病的综合发生率下降了9.00%,病死率下降了16.48%,单头新增纯收益为141.26元/头,总经济效益和年经济效益为31.30万元。B猪场经综合措施防控后,生猪疫病的综合发生率下降了7.44%,病死率下降了26.44%,单头新增纯收益为114.44元/头,总经济效益和年经济效益为16.01万元;C猪场经综合措施防控后,生猪疫病的综合发生率下降了9.36%,病死率下降了9.93%,单头新增纯收益为135.41元/头,总经济效益和年经济效益为35.71万元。综上所述:2013-2018年间,PRRSV是云南地区规模养殖场发生疫病的主要病原,多种病原混合感染为主要临床表现。分离获得PRRSV流行毒株20株,PRRSV云南毒株以Intermediate亚群、JXA1-like亚群和HP-PRRSV vaccine-like亚群为主要流行毒株。中药“黄氏蓝瘟康”能够在体外有效抑制PRRSV增殖,其可能的作用机制是通过影响整合素β3与RACK1蛋白相互作用,调控NF-κB信号通路的激活,达到抑制PRRSV增殖的效果。应用中药“黄氏蓝瘟康”的防治措施能够提高养殖场疫苗免疫抗体水平,控制主要流行疫病,提高平均窝产活仔数和仔猪断奶成活率,产生明显的经济效益。