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目的：建立柱前衍生RP-HPLC测定血清胆汁酸的方法。方法： 1．用BMC作荧光剂、在DCC催化下对游离和甘氨结合胆汁酸进行柱前衍生化。甘氨和牛磺结合胆汁酸经甘氨结合胆汁酸水解酶水解后，再进行衍生化。2．用RP-HPLC分离测定衍生化的胆汁酸；色谱条件：色谱柱waters Nova C18 (3.9×150mm，5μm)，柱温25℃，流动相：甲醇、乙腈和水，流速1ml/min，梯度洗脱。荧光检测：激发波长330nm，荧光波长410nm。采用内标（月桂酸）法定量。3．用Sep-PakC18固相小柱萃取血清样品。结果：胆汁酸在50～400pmol范围内具有良好线性相关性，r为 0.9988～0.9998，回收率85.40～100.45％，方法的变异系数不超过8%。检测时间<WP=5>24min，最低检测限2～4pmol。结论：本文建立的血清胆汁酸的RP-HPLC分析法，能实现血清中微量胆汁酸的测定，且选择性强、灵敏度高、重复性好、测定时间短。