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贵州石笔木Tutcheria kweichowensis Chang et Y.K.Li是常绿乔木,树形高大通直,材质优良,果实富含脂肪、蛋白质、VE、VC、茶多酚等,颇具开发利用价值。但由于其自然繁殖率低,散布受限,自然分布区狭窄,局部种群普遍,种群斑块约为100m2-30000 m2,各种群间通过扩散个体相互联系,已成为具有Meta-种群生态特征的珍稀濒危植物。在自然状态下,贵州石笔木结实率较低,种子深度休眠、萌发困难,林下更新幼苗少见。在不同的种群斑块中,5年生及以下幼苗所占比例的结果≦20%,野生种群已严重衰退,种群扩散困难。本文通过对贵州石笔木种子的生物学特性测定、种子内含抑制物质活性检测、种子休眠破除试验以及适宜种子萌发的温度、湿度和光照调控研究,测试分析了贵州石笔木种子萌发的内含抑制物质活性,发现了有效的休眠解除方法,揭示了贵州石笔木种子特性及其萌发生理的基本特征,筛选出了种子萌发与育苗栽培的适宜条件及其应用技术,取得如下研究结果,为有效保护和合理利用贵州石笔木物种资源提供科学依据。(1)贵州石笔木种子肾形、黑褐色或深棕色、种壳坚硬、光滑有角质、种皮坚硬致密,属典型的硬实种子,胚乳富含油脂,吸水率≦15.62%,自然萌发率≦27.11%。种子千粒重、生活力、含水率、硬实率分别为0.92 kg、66.17%、11.75%和89.17%;种子内可溶性糖、可溶性蛋白、淀粉、脂肪含量分别为20.84%、11.19%、7.96%和50.27%。(2)采用浸提法实验,把得到不同处理的贵州石笔木种子浸提液分别浸种白菜种子,测定不同浸提液对白菜种子萌发的影响。结果表明:贵州石笔木种子中含有抑制萌发的物质,其生物活性受浸提溶剂、浸提温度、浸提浓度、浸提部位影响,醇溶剂浸提液的抑制物质活性大于水溶剂浸提液,种皮中的抑制物质活性显著大于胚乳中的抑制物质活性。各个不同处理的贵州石笔木种子浸提液均对白菜种子发芽、主根和幼苗的生长有显著抑制作用,抑制物质的活性随着浸提液的浓度增大而增强、随着浸提液温度的升高而增高。(3)在环境条件适宜的情况下,种子不能萌发的现象称为种子休眠,主要是由种子萌发的抑制物质引起的,即种子内含的有机酸类、酚类、醛类、不饱和内酯类等,有机酸类对种子萌发有积极的抑制作用,对种子萌发过程中的生理代谢活动具有较大影响,在种子种皮和胚乳中的分布较为普遍。对贵州石笔木种子浸提液使用系统分离法,以石油醚、乙醚、乙酸乙酯和甲醇为浸提溶剂,得到种皮、胚乳各有机相的浸提液,减压浓缩后,采用气谱?质谱联用仪(GC-MS)分析鉴定,得到六类20种相对含量较高的有机化合物,分别是有机酸类、烯类、酚类、酯类、醇类、醛类有机化合物,其中有机酸类物质相对含量都在80%以上、占绝对优势,是贵州石笔木种子内含的主要抑制物质。贵州石笔木种皮和胚乳浸提液中的有机化合物有5类10种,其中有机酸类有:油酸、亚油酸、十六烷酸、十八烷酸、乙酸、2?甲基丁酸共5种;烯类有三十碳六烯1种;酚类有苯酚1种;脂类有油酸甲酯1种;醛类有5?(羟甲基)糠醛1种。种皮中特有的有机化合物有10种,分别为乙酸、2?甲基巴豆酸、2?羟基?γ?丁内酯、单乙酸甘油酯、亚油酸甲酯、甘油二乙酸酯、丙酮醇、糠醇、1,3?丁二醇、糠醛、乙醇醛;胚乳中特有的有机化合物仅有1,2,3?丙三醇1种。(4)贵州石笔木种子休眠的技术的研究结果表明,分别采用初始温度为100℃浸种24h、浓度为15%的NaOH溶液浸种20min、浓硫酸浸种15min、浓度为6%的H2O2溶液浸种12h、浓度为300mg/l的GA3溶液浸种24h、浓度为8%的KH2PO3溶液浸种8h,都能够显著提高贵州石笔木种子的萌发率,种子发芽率分别是64%、60.67%、56%、49.33%、48%、47.33%。热水浸种处理可软化种皮、除去表层的蜡质和油脂,种子内含抑制物质被浸出,提高了种皮的通透性和降低了种子的内含抑制物质,促进了种子的萌发作用;酸、碱处理使种子的种皮被腐蚀,溶解种皮内化学物质,使种皮变薄和透性增强,降低了种皮抑制物质对种子萌发的阻碍作用,使种子更易于吸水和吸氧呼吸,从而提高了种子的萌发率。(5)为探索贵州石笔木种子萌发适宜的温度及光照条件,开展了贵州石笔木种子萌发温度与光照的调控实验。结果表明,25℃恒温箱的种子,在第10d后开始出现露白,第15d后胚根、胚芽开始生长;20℃恒温箱中的种子,在第20d后开始出现露白;30℃恒温箱中的种子,在第25d后开始出现露白;而15℃恒温箱中的种子,在第40d后才出现露白。光照对种子的萌发实验没有明显影响。通过对贵州石笔木种子萌发过程参与生理活动酶活性的测定结果表明,贵州石笔木种子内的蛋白酶、淀粉酶和酸性磷酸酶活性在不同萌发阶段,均表现为温度25℃条件时活性最强,光照时间的长短对贵州石笔木种子萌发过程中的营养物质含量变化及酶活性变化没有显著影响。由此表明,贵州石笔木种子在15℃~30℃的温度范围内可以萌发,其25℃左右是最适宜于的种子萌发的温度。(6)贵州石笔木种子的萌发对温度具有敏感性,环境温度的制约是造成贵州石笔木种子萌发障碍的重要原因。通过对贵州石笔木种子生物学特性和破出休眠技术试验的研究,总结出在贵州石笔木种子播种前,将种子先置于温度为25℃左右,保持相对湿度为80%~85%的环境中,湿沙层积40d后,取出,使用初始温度为100℃的热水浸泡24h,再用15%的NaOH溶液浸种20min,经流水冲洗1h后,播种育苗的效果较好。