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目的:探讨胃癌中DNMT3A2沉默EpCAM在胃癌中的作用机制方法:采用RT-qPCR方法检测在DNMT3A2过表达或敲低细胞中EpCAM的表达变化,并且使用BGS分析敲低DNMT3A2表达后,上皮粘附分子EpCAM启动子区CpG岛位点的甲基化程度。IP实验分析并验证DNMT3A2与组蛋白甲基酶EZH2的结合关系,利用RT-qPCR分析DNMT3A2过表达的稳定细胞系中瞬时沉默EZH2/SUZ12后EpCAM表达变化;构建MKN45干扰EpCAM细胞系和MKN28过表达EpCAM细胞系,应用CCK-8法、划痕实验和Transwell实验分别检测胃癌细胞系MKN45和MKN28中稳定干扰或过表达后,细胞的增殖能力、迁移能力及侵袭能力的变化;RT-qPCR实验分析EpCAM在胃癌病例组织中的表达模式,并统计分析EpCAM的表达模式与胃癌患者组织病理特性之间的相关性。结果:1)在 MKN28-shDNMT3A2 和 MKN45-DNMT3A2 的细胞系中,RT-qPCR 检测EpCAM表达的变化,发现DNMT3A2过表达的细胞中EpCAM表达下调,DNMT3A2低表达的细胞中EpCAM表达上升。2)软件生物信息学预测到EpCAM的启动子区有CpG岛;BGS检测发现DNMT3A2稳定表达抑制后,EpCAM启动子区甲基化率由57.8%降至20%。3)IP实验证明了 DNMT3A2与EZH2的结合作用,暗示了 DNMT3A2调控EpCAM过程中有EZH2的参与。4)在MKN45-DNMT3A2细胞中,瞬时转染EZH2,RT-qPCR分析发现,相对于vector,RNAi-EZH2细胞中,EpCAM表达上调;瞬时转染SUZ12出现相类似与EZH2的现象,即RNAi-SUZ12上调了 EpCAM的表达。5)划痕实验和Transwell实验发现EpCAM表达抑制后,抑制了胃癌细胞的迁移和侵袭能力,反之,则促进了胃癌细胞的迁移和侵袭能力,且不影响胃癌细胞的增殖。.6)EpCAM在胃癌中的差异性表达及其相关性分析发现,EpCAM在胃癌组织中呈低表达模式(3/46),且与淋巴结转移及血管侵犯相关。结论:1.DNMT3A2沉默EpCAM表达可能与DNA甲基化作用有关,同时有组蛋白甲基化酶EZH2的参与。2.EpCAM能够抑制胃癌细胞的迁移和侵袭能力。3.EpCAM在胃癌病例组织中呈低表达模式,并与淋巴结转移相关。