小麦根腐离蠕孢(Bipolaris sorokiniana(Sacc.)Shoemaker)是一种能侵染小麦、大麦、燕麦等谷类作物的土传真菌。除了侵染作物的根引起根腐病外，小麦根腐离蠕孢还能侵染作物的叶，引起叶斑病，造成作物的地上部分枯死等症状。近年来，荧光蛋白在动物、植物及病原真菌方面得到了广泛的应用。利用荧光蛋白标记的真菌可以直观地观察真菌在植物组织中的侵染和定殖，研究植物与病原菌之间的互作。　　 本研究采用农杆菌介导法将gfp基因导入B.sorokiniana菌株Bs-1中，对转化子进行荧光表达、PCR验证、遗传稳定性、生长特性和胞外酶代谢分析。选用与野生型菌株表现相近的转化子Bs-GFP研究B.sorokiniana对小麦品种矮抗58根和叶片的侵染过程。结果发现转化子Bs-GFP的菌丝和分生孢子表达明亮的绿色荧光，利用基因特异标记扩增证明gfp基因被整合到真菌的基因组中。对GFP标记菌株Bs-GFP的遗传稳定性和生长特性分析表明，gfp基因在转化子中能稳定地遗传，菌落的生长速度和胞外酶代谢与野生型菌株相比没有显著差异。菌株Bs-GFP可以在小麦的地下和地上部分引起病症，而且与野生型菌株Bs-1在小麦植株根系和茎基部组织定殖的数量(即CFU值)相近。利用GFP标记的B.sorokiniana菌株侵染小麦，发现在侵染早期，根尖和分生区病原菌定殖较少，随侵染时间的延迟，在根内出现孢子及菌丝，侵入根内的病原菌大多集中在细胞的间隙中，也有少部分菌丝穿行于细胞内。在根的某些颜色较深的病斑部位没有发现菌丝的定殖；而在叶部的病斑上却能观察到大量菌丝的聚集，且菌丝交织成网状。　　 透射电镜观察发现，在感病品种矮抗58中，病原菌侵染在早期就可导致根内线粒体的大量降解，而在病原菌生长较快的区域，线粒体却是大量增殖的，为病原菌的进一步扩张提供能量。而在叶部组织，发现大量叶绿体结构已经变异，并且发生了很严重的质壁分离现象，叶肉细胞内可见大量线粒体及其他细胞物质的降解，细胞趋于死亡。本研究利用绿色荧光蛋白标记B.sorokiniana，为揭示这种土传真菌与小麦的互作提供一种直观的观察方法，解决常规方法和其他标记(例如GUS基因标记)等破坏性方法不能进行活体、连续观察的问题。