国兰是指兰科兰属(Cymbidium Sw.)植物中的一部分地生种。我国兰花文化源远流长,国兰具有极高观赏价值和经济价值,但传统分株繁殖周期长、系数低,无法满足市场需求。本研究以多种国兰为植物材料,对其组织培养技术进行研究,优化了国兰组织培养体系,加快国兰繁殖速度、提高繁殖系数,为国兰工厂化育苗提供科学依据。主要研究结果如下:1.国兰杂交及种子非共生萌发。该试验共计37个杂交组合,其中19个杂交组合种子可萌发获得根状茎。选取‘贵州红’春兰(C.goeringii ’Guizhou Red’)、‘泗港水’墨兰(C.sinense‘Si Gangshui’)和’紫寒兰’(C.kanran‘Zi Hanlan’)3 种国兰自交种子进行非共生萌发试验,结果表明:当种子形态介于絮状至粉状间时间段,3种国兰萌发数均显著高于其他种龄,萌发时间最短。采用10%的NaClO溶液浸泡3种国兰种子5-20min均能提升萌发速度、提高萌发数量,浸泡10min时,3种国兰种子萌发时间比CK组缩短30-50d,种子萌发数为CK组的4.47-8.35倍,显著高于其他处理。9种培养基为中,A3:MS+1.0mg/L 6-BA+1.0mg/L NAA+2.0g/L胰蛋白胨最适于’贵州红’种子萌发;A9:改良Hyponex 1+1.0mg/L6-BA+0.5mg/L NAA最适于‘泗港水’种子萌发;A7:改良Hyponex 1+1.0mg/L NAA+100ml/L CM最适于’紫寒兰’种子萌发。2.根状茎增殖。取’四喜蝶’(C.goeringii‘Sixi Die’)ב老蕊蝶’(C.goeringii‘Laorui Die’)春兰、’仙殿白墨’墨兰(C.sinense‘XIandian Baimo’)、’大雪素’莲瓣兰(C.tortisepalum’Da Xuesu’)和’贵妃醉酒’建兰(C.ensifolium ’Guifei Zuijiu’)4 种国兰根状茎进行培养,发现:光照培养的4种国兰根状茎增殖系数均极显著大于暗培养。3个6-BA和NAA浓度梯度中,高浓度6-BA(1.0mg/L)和NAA(5.0mg/L)有利于’四喜蝶’ב老蕊蝶’根状茎增殖,低浓度6-BA(0.1mg/L)和NAA(1.0mg/L)有利于’大雪素’、’仙殿白墨’和’贵妃醉酒’根状茎增殖。以改良Hyponex 2为基本培养基,4种国兰根状茎鲜重增值系数分别为MS培养基的3.67、1.50、1.78和1.99倍,显著高于其他3种培养基。添加2g/L胰蛋白胨对于春兰根状茎增殖促进作用最显著,添加1g/L酵母浸提物对莲瓣兰、墨兰和建兰根状茎增殖促进作用最显著。3.根状茎的芽分化。在3种植物生长调节剂中,6-BA浓度是影响’四喜蝶’×’老蝶’杂交种、‘大雪素’、’仙殿白墨’和’贵妃醉酒’ 4种国兰根状茎芽分化的主要影响因子,其中 D7:2.0mg/L 6-BA+0.5 mg/L Ad+2.0 mg/L NAA 最适于’四喜蝶’ב老蕊蝶’根状茎芽分化,分化率达 87.88%。D8:2.0mg/L6-BA+1.0 mg/LAd+0.5 mg/LNAA最适于’仙殿白墨’和’贵妃醉酒’根状茎芽分化,分化率分别为100.00%和35.71%。D9:2.0 mg/L 6-BA+2.0 mg/L Ad+1.0 mg/L NAA最适于‘大雪素’根状茎芽分化,分化率达91.58%。‘四喜蝶’×’老蕊蝶’芽诱导最适培养基成分为Es:2g/L改良Hyponex2+2g/L胰蛋白胨+40g/L蔗糖+0g/LAC芽分化率为88.89%,出芽系数5.00个;’大雪素’、’仙殿白墨’和’贵妃醉酒’芽诱导最适培养基成分均为E1:1g/L改良Hyponex2+20g/L蔗糖+0g/LAC,芽分化率分别达100%、94.44蕊%、77.78%。AC浓度为影响四种兰根状茎分化的主要因子,随着AC浓度增大芽分化率和出芽系数显著减小。添加2g/L胰蛋白胨显著促进春兰根状茎芽分化,但2种有机添加物显著抑制’大雪素’、’仙殿白墨’和’贵妃醉酒’ 3种国兰根状茎芽分化。4.生根壮苗及移栽。同浓度IBA生根壮苗效果优于NAA。较高浓度(2.0mg/L IBA)生长素更有利于’四喜蝶’×’老蕊蝶’春兰生根壮苗效果,生根率达86.67%。’大雪素’、’仙殿白墨’和’贵妃醉酒’生根壮苗需生长素浓度偏低,以添加1.0mg/L IBA最适宜,生根率分别达80.00%、77.78%和71.11%。以纯水苔作为移栽基质,移栽成活率为100%,平均生长量1.16g,新生根量2.13条,生长状态显著优于其他移栽基质。