西藏绒山羊多胎性状候选基因BMP15、GDF9、BMPR1B多态性分析

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西藏绒山羊作为西藏地区特有的养殖动物,其集毛、皮、肉、绒、奶于一身具有重要的经济价值,但是西藏绒山羊存在着繁殖性能低下的弊端,这阻碍了西藏地区经济养殖的发展,因此加强对西藏绒山羊的选育工作,提高生产性能是提高牧民养殖效益与收入的有效途径与方法。而寻找高繁殖力相关的分子标记或主基因,运用分子标记辅助选择是快速实施良种繁育与改良的有效手段。研究表明骨形态发生蛋白15(BMP15)、生长分化因子9(GDF9)与骨形态发生蛋白受体1B(BMPR1B)基因在早期卵泡的生长和分化中起着最重要的作用。目前对部分绵羊山羊品种BMP15、GDF9及BMPR1B基因的相关研究已经取得了一定的成果并筛选到了一些可能的影响高繁殖力性状的突变,而西藏绒山羊中的相关研究尚未见报道。因此本实验选择216只雌性西藏绒山羊,采集耳组织,提取其基因组DNA通过PCR测序及RFLP等方法对其多胎性状候选基因BMP15、GDF9与BMPR1B进行了多态性的检测与分析。本试验获得的主要结果如下:(1)西藏绒山羊BMP15与GDF9基因CDS序列长度分别为1185 bp与1362 bp;西藏绒山羊BMP15与GDF9基因的克隆测序全长拼接结果与济宁青山羊相似性均达到99%以上;对BMP15与GDF9所编码蛋白质序列进行进化树分析后表明西藏绒山羊与山羊绵羊的进化方向一致;(2)在BMP15基因上发现两个新的SNP位点,分别为G732A与C805G,其中G732A突变并未引起氨基酸的变化,各基因型频率分别为GG型0.695、GA型0.282、AA型0.023;C805G突变则导致了氨基酸由谷氨酰胺变为谷氨酸,基因型频率分别为CC型0.620、CG型0.320、GG型0.060;(3)在西藏绒山羊GDF9中检测到两个已知的SNP位点C719T与G1189A,该两个位点的碱基改变均导致了氨基酸的改变。其中C719T突变导致了丙氨酸变为缬氨酸,基因型频率分别为CC型0.944、CT型为0.056,没有发现TT型;G1189A突变导致缬氨酸变为异亮氨酸,各基因型频率分别为GG型0.579、GA型0.305、AA型0.116;同时发现已报道的GDF9基因G3与G4突变在西藏绒山羊中均为纯合突变;(4)检测中并未发现西藏绒山羊中有G1、B2、B3、B4、FecXH、FecXI、FecXL、G2、G5、G6、G7、G8、FecGE、FecTT 及 FecB 突变存在。结果表明:西藏绒山羊与其它山羊绵羊品种BMP15和GDF9具有同源性,且序列相似性很高;西藏绒山羊BMP15、GDF9和BMPR1B基因在遗传上是比较保守的,突变率较低;西藏绒山羊与沂蒙黑山羊等山羊品种BMP15、GDF9和BMPR1B基因具有相似的多态性分布。这些数据为西藏绒山羊高繁殖力品种的选育与研究工作奠定了基础。
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