[目的]： 1、研究131I标记Rituximab的标记方法、标记物对Raji细胞的免疫活性及标记物的体外稳定性。 2、研究Raji细胞的生物学特性,131I-Rituximab对Raji细胞的生物学效应。 3、研究131I-Rituximab在荷人Raji细胞移植瘤裸鼠的体内分布及放射免疫治疗效果,为放射免疫导向治疗提供实验依据。 [方法]： 1、Iodogen法将131I标记于Rituximab,分别在反应2、4、6、8分钟测定标记率和对Raji细胞的免疫活性,测定不同反应时间的标记物的放化纯度采取三氯醋酸法,用SephadexG25凝胶柱进行纯化。 2、对Raji细胞的生物学特性进行研究,用台盼蓝染色计数法测细胞活性；用流式细胞术测定细胞表面CD20抗原的表达。将细胞分为131I-Rituximab组、单纯抗体(Rituximab)组、单纯核素(131I)组、空白对照组。流式细胞仪Annexin V-FITC/PI双染法测定检测各组Raji细胞凋亡,流式细胞仪DNA倍体法检测各组Raji细胞周期。 3、裸鼠皮下接种Raji细胞成瘤,取5只成瘤裸鼠,尾静脉注射131I-Rituximab,给药后72小时后处死裸鼠,取血和主要脏器,测放射性计数,了解药物的分布特点。取30只成瘤裸鼠,随机分成6组,分成高、中、低剂量治疗组、单纯抗体组、单纯核素组、空白对照组6组,进行裸鼠的放射免疫治疗研究,观察裸鼠一般情况,测量裸鼠肿瘤体积变化,注射后不同时间进行SPECT显像,4周后处死裸鼠,取瘤,福尔马林固定后,切片,HE染色后病理分析。 [结果]： 1、131I-Rituximab标记物随反应时间的增加其标记率和放化纯度有所提高,而细胞结合率则下降。反应时间4分钟时对应标记率平均值为90.0％,采用三氯醋酸法测其放化纯度平均值为98.3％,与Raji细胞结合率平均值为35.4％,其稳定性好,4℃贮存24h,其放化纯度仍为91.0％。 2、Raji细胞活性大于90％,流式细胞仪测得Ralji细胞表面CD20抗原表达率为98.03％。4组实验中,131I-Rituximab组的凋亡率高于其他各组。131I-Rituximab细胞周期发生变化,大部分被阻滞在G2期。 3、体内分布实验中,131I-Rituximab主要分布于肿瘤内。荷瘤裸鼠各治疗组与对照组比较,肿瘤生长减慢,肿瘤生长抑制率具有剂量时间依赖性,SPECT显像可见肿瘤部位放射性浓聚,组织病理学检测显示治疗有效。 [结论]： 1、Iodogen法标记131I于Rituximab,标记物标记率高,稳定性好,体外与Raji细胞结合后能够保持一定的免疫活性。4分钟为最佳反应时间,此时标记率、放化纯度和标记物的免疫活性均较高,满足细胞实验和动物实验的要求。 2、131I-Rituximab能够诱导Raji细胞凋亡,并调控细胞周期。 3、131I-Rituximab可特异性地定位于肿瘤组织,并发挥放射免疫导向治疗作用,具有潜在的临床应用价值。