论文部分内容阅读
本文首先对龙胆环烯醚萜苷类化学成分进行了研究。采用反相硅胶色谱和制备高效液相色谱技术从龙胆70%乙醇提取物中分离得到6个环烯醚萜苷类化合物，通过UFLC/Q-TOF-MS和NMR解析鉴定了他们的结构，分别为：龙胆苦苷、獐牙菜苦苷、獐牙菜苷、马钱子酸、8-表马钱子酸和6’-O-β-D-吡喃葡萄糖基龙胆苦苷，其中，8-表马钱子酸和6’-O-β-D-吡喃葡萄糖基龙胆苦苷为从该植物中首次分离鉴定。以正丁醇-水（1:1）为溶剂体系，采用高速逆流技术从龙胆粗提物中分离制备了纯度可达98%以上的龙胆苦苷，该方法分析成本低，环保低毒，而且简便快速。建立了同时测定龙胆中龙胆苦苷、獐牙菜苦苷、獐牙菜苷的高效液相色谱法，该方法准确、简便、具有良好的重现性和稳定性，适合于龙胆的质量控制研究。同时采用大孔吸附树脂技术优化了龙胆中环烯醚萜苷类成分的纯化工艺，为药效学研究和体内药动学研究奠定了物质基础。对龙胆有效部位抗肝损伤作用进行了体内外活性研究。首先建立了CCl4诱导化学性肝损伤的细胞模型，采用MTT法检测药物处理后各组细胞的存活率，体外研究结果表明，龙胆有效部位浓度低于20mg/L时，能增强细胞存活率；通过检测细胞培养上清液中ALT和AST的活力，细胞内SOD和MDA含量的变化，发现龙胆有效部位具有抗氧化和清除氧自由基的作用。通过建立CCl4诱导的小鼠急性肝损伤模型，观察血清生化指标和肝脏组织病理学变化，结果表明，龙胆有效部位对CCl4引起的急性肝损伤具有明显的保护作用。对龙胆抗肝损伤活性成分在大鼠体内的药代动力学进行了研究。首次建立了同时测定大鼠血浆中龙胆苦苷和獐牙菜苦苷的超快速液相色谱-串联质谱分析方法，并将其成功应用于大鼠灌胃给予龙胆提取物后龙胆苦苷和獐牙菜苦苷的药动学行为研究。结果表明，龙胆苦苷和獐牙菜苦苷在雄、雌大鼠体内的药动学特征存在显著性差异（p<0.05）。采用已建立的高效液相色谱法研究了龙胆抗肝损伤有效部位在大鼠体内药动学和组织分布特征。血药浓度-时间曲线符合二室模型，龙胆苦苷在大鼠体内主要部位的分布顺序为：肝脏＞肾脏＞肺脏＞心脏＞脾脏。