肿瘤标志物在疾病早期,其相关活性分子的浓度很低,所以,利用核酸的高灵敏度检测对于疾病的早期诊断和后续治疗是非常重要的。本文将微流控生物反应器技术与表面增强拉曼光谱相结合,其在生物分析领域中表现出的精确、快速、量少、选择性好等特点,通过构建靶替代循环和多功能智能探针发夹DNA引发的循环放大方法,利用纳米金生物条形码技术,准确定量的对肿瘤标志物miRNA-203进行了检测。本论文主要分为下面两个部分的内容:1、将微流控生物反应器技术与表面增强拉曼光谱相结合,制作了一种聚二甲基硅氧烷(Polydimethylsiloxane,PDMS)/玻璃微流控生物反应器,该芯片采用的是Ti-Au两层同心圆型微生物反应器,通过微注射泵、微管将DNA反应液、细胞注入至芯片内进行反应,待反应结束,将反应液移到检测室内,进行拉曼光谱检测。2、基于表面增强拉曼光谱检测技术,构建了一种多功能智能探针发夹型靶向识别探针DNA循环放大SERS检测miRNA-203的方法。本方法主要以多功能智能探针发夹型靶向识别探针DNA、聚合酶、内切酶以及携带有拉曼信号分子的纳米金生物条码探针为原料,设计了双重循环放大模式(即靶替代循环和聚合酶链取代循环),其放大效率得到显著提高。在优化得到的最佳反应条件下,此方法检测miRNA-203的线性浓度范围为1.0×10-14~1.0×10-7 M,检测限可达6.3 fM(S/N=3),实现了miRNA-203的灵敏检测。该方法操作简便快速,灵敏度高,选择性好,为表面增强拉曼检测在生化分析中的应用提供了一种新颖的思路和办法。