论文部分内容阅读
[摘要]目的研究绝经后骨质疏松症(PMOP)大鼠骨髓基质细胞(BMSCs)增殖分化能力的变化,研究雌激素及雷诺昔芬对正常及PMOP大鼠BMSCs增殖分化能力的影响。方法1.去除3月龄健康SD大鼠双侧卵巢建立PMOP模型,随机选取部分大鼠于建模一周后服用雌激素或雷诺昔芬,以明确两种药物防止PMOP的作用。实验分组为卵巢切除术组(OVX)、假手术组(Sham)、卵巢切除加雌激素治疗组(OVX+E2)、卵巢切除加雷诺昔芬治疗组(OVX+Ralo),每组8只大鼠。2.手术后8周SD大鼠建模结束,并结束用药。通过体重、骨密度测量、血清生化检测及组织学观察对动物模型进行评价,并观察药物对机体的影响。3.同时无菌条件下取OVX组及Sham组大鼠的股骨胫骨,以获得BMSCs;培养两种来源的BMSCs,取生长良好的第3代、第4代BMSCs进行对比实验。以MTT法检测两种来源的BMSCs增殖的差异,以酶联免疫法检测成骨指标碱性磷酸酶(ALP)合成量的差异,同时观察传代对它们增殖分化能力的影响。4.以两种浓度的雌激素及雷诺昔芬作用于两种来源的BMSCs,观察二者对正常及PMOP大鼠BMSCs增殖分化的影响。结果1.OVX组大鼠的全身BMD值显著低于其余三组(P<0.01),血清BGP浓度显著高于其它三组(P<0.01或P<0.05);而OVX+E2组,OVX+Ralo组大鼠血清中BGP浓度与Sham组间无显著差异(P>0.05)。股骨组织切片显示OVX组大鼠骨小梁排列稀疏,骨髓腔连接成片,腔内空虚或空泡增多;而OVX+E2组,OVX+Ralo组几乎与Sham组一样骨小梁粗壮、饱满,形态结构完整,连接成网状。2.Sham组的BMSCs增殖缓慢,其ALP合成量显著低于OVX组。第4代Sham组的BMSCs比第3代增殖缓慢;相反,传代后OVX组BMSCs的增殖却加快;但传代后各组ALP合成量无明显变化。3.雌激素可促进第3代BMSCs的ALP合成增加,有促进OVX组BMSCs增殖的趋势。雷诺昔芬可促进第4代BMSCs的增殖,雷诺昔芬可促进OVX组BMSCs的ALP合成增加。结论1.切除3月龄SD大鼠的双侧卵巢8周可以成功地建立PMOP模型。雌激素及雷诺昔芬能有效降低去卵巢大鼠的骨转换率,有效防止骨质疏松。2.OVX组的BMSCs的增殖活力、成骨分化能力显著高于Sham组。