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bFGF和TGF-β1在脱细胞真皮基质生物学转归中的表达组织缺损的修复是外科系统常见临床问题,脱细胞真皮基质(acellular dermal matrix, ADM)作为一种新型的真皮替代物,用于组织缺损的修复,现已广泛应用于烧伤整形、神经外科、耳鼻咽喉、牙周等领域,并取得了满意的临床效果。但对于ADM在长期生物学转归过程中碱性成纤维细胞生长因子(Basic fiborblast growth factor, bFGF)和转化生长因子β1 (Transforming growth factor-β1, TGF-β1)的表达变化规律,国内外尚未见相关报道。本研究采用Dispase-Triton法制备ADM,异体移植于wistar大鼠背部皮下,观察其在长期的生物学变化中bFGF和TGF-β1的表达及ADM的血管化规律,揭示ADM的生物学转归机制。实验目的：探讨体内ADM长期生物学转归中bFGF和TGF-β1的表达变化及ADM的血管化规律。实验方法：第一部分：制备ADM选用成年雄性Wistar大鼠8只,切取大鼠背部全层皮肤(约4×4cm2),使用双面胶将皮肤的表皮面粘于鼓式取皮机鼓面上,反取去除皮下组织制成厚约0.6mm的皮层,再分剪成2×2cm皮片,共50片。皮片随机分成5组,每组10片,投入2.5U/ml Dispase(4℃)分别孵育24h、48h、60h、72h、84h,脱去表皮层,然后每组再分别投入0.5%Triton X-100溶液24h、48h、60h、72h、84h,常温振荡脱去细胞。采用组织学和分子生物学方法检测比较各时间点所制备的ADM的优劣。第二部分：bFGF和TSF-β1在ADM转归中的表达选用成年雄性Wistar大鼠105只,21只用于制备ADM (2.5U/ml Dispase4℃孵育60h,0.5%Triton X-100常温震荡脱细胞60h)。剩余84只随机分为14组(n=6),于其背部脊柱左侧作一长约2cm与脊柱平行的梯形切口,切开皮肤全层及皮肌至深筋膜表面,钝性分离,形成足够面积(约2.5*2.5cm2)空隙,将制备好的ADM(2.0cm×2.Ocm2)真皮面向上植入腔隙,平展,0号丝线固定四角于深方筋膜上,将皮瓣覆盖ADM,间断对位缝合背部皮肤创口。于术后3、5、7、10d,2、3、4、6、8、10w、4、6、8、10M取材。采用常规免疫组化方法检测bFGF和TGF-β1及CD34的表达,分析其不同时间点bFGF和TGF-β1表达及ADM血管化规律。实验结果：1.采用Dispase-Triton法将皮肤置于2.5U/ml Dispase4℃孵育60h,再置入0.5%Triton X-100常温振荡60h后可以完整去除表皮、彻底脱除细胞成分,维持胶原结构排列正常。2.bFGF和TGF-β1在ADM转归中的表达。(1)bFGF：3d时开始出现阳性表达,并于10d达到峰值,4w后趋于稳定,8w后未见明显变化,与正常皮肤表达一致。(2)TGF-β1：3d时开始表达,并一直伴随bFGF持续增高,于2w达到峰值后逐步下降,4w后趋于稳定,10w后表达同正常皮肤。(3)CD34：5d时出现明显的阳性表达,持续高表达至2w达到峰值,6w后趋于稳定,与正常皮肤表达相同。实验结论：1.采用Dispase-Triton法将皮肤置于2.5U/ml Dispase4℃孵育60h,再置入0.5%Triton X-100常温振荡60h后制备的ADM符合实验要求。2.在ADM长期的生物学转归过程中,ADM的改建首先从周边开始逐渐向中央迁移,并于6w-8w后改建趋于稳定,被视为自身组织,并参与机体正常组织代谢过程。