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本研究对池蝶蚌酸性磷酸酶(ACP),碱性磷酸酶(ALP),过氧化氢酶(CAT),溶菌酶(LYZ)和酚氧化酶(PO)活力进行了研究,克隆了池蝶蚌和三角帆蚌超氧化物歧化酶基因(SOD),过氧化氢酶基因(CAT),谷胱甘肽S转移酶基因(GST),肿瘤坏死因子基因(QM)和巨球蛋白基因(α2-M),并对细菌感染后的表达和组织分布情况进行了研究。一.酶活力1.抗菌力结果表明,池蝶蚌对嗜水气单胞菌和枯草芽孢杆菌的抗菌力分别为0.83±0.01U和0.34±0.01U,三角帆蚌对这两种细菌的抗菌力与之相比较弱,分别为0.57±0.03U和0.26±0.01U;两种蚌对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均无抑制作用。2.池蝶蚌血清和血细胞中均能够检测到ACP和ALP活性,血清中的酶活性总体上高于血细胞(P<0.05),不同年龄组血清或血细胞中酶活性均存在差异性(P<0.05)。血清中的溶菌酶活性随着年龄的增长而显著增加,4龄组溶菌酶活力为0.93±0.05U,比1龄组约高一倍。血细胞中溶菌酶活性稳定在一定的水平内,均值为0.44U。血清中的CAT活性总体上强于血细胞,1龄池蝶蚌中血清的CAT活性约为血细胞中的2倍。血细胞的PO活性远远强于血清。二.基因克隆及表达特性研究1.本文分别克隆到了池蝶蚌和三角帆蚌中GST部分cDNA序列,嗜水气单胞菌对池蝶蚌GST有诱导作用,而三角帆蚌感染嗜水气单胞菌后基因表达量呈现先降低而后逐渐升高的趋势。GSTmRNA在蚌的肝组织中表达量较多。2.QM推导的氨基酸序列中含有一个蛋白酶C磷酸化位点(PKC)和一个核糖体蛋白L10的标签序列。1龄组QMmRNA表达量较少,2龄最高,3龄和4龄有所降低。细菌感染后,池蝶蚌中的QM mRNA表达先降低而后逐渐升高,而三角帆蚌中表达量一直比较低,QMmRNA在唇瓣,斧足和肝脏中均有表达。3.不同年龄组CAT mRNA表达同CAT酶活力测定的结果相符。嗜水气单胞菌感染后的3小时,池蝶蚌CATmRNA表达量高于三角帆蚌,蚌的11种组织中均检测到CAT mRNA,肾中表达较强。4.1龄和4龄样品中未检测到SOD mRNA,池蝶蚌感染后未检测到基因表达,三角帆蚌中在感染后3小时和6小时检测到表达,SOD mRNA在这两种蚌的唇瓣和肾中均表达。5.不同年龄组池蝶蚌α2-M mRNA随年龄逐渐下降,细菌感染后池蝶蚌α2-M表达先降低后升高,而在三角帆蚌始终维持很高的活性,只在部分池蝶蚌组织中检测到基因,而在三角帆蚌的11种组织中均有表达,且血细胞中的表达量较高。