鹿茸可每年完全再生,其过程是基于干细胞的增殖和分化。鹿茸的间充质干细胞（Mesenchymal stem cells,MSCs）对鹿茸再生及快速生长发育发挥着重要作用,而影响鹿茸MSCs增殖、迁移及分化的作用机制尚未探究清楚。MSCs可分泌多种细胞因子,其中最为重要的一种是肝细胞生长因子（Hepatocyte growth factor,HGF）,能与c-Met结合调控细胞的增殖、迁移,促进组织器官再生。本研究以鹿茸MSCs为试验材料,克隆HGF基因CDS区,构建慢病毒过表达HGF载体与HGF干扰RNA,上调和干扰鹿茸MSCs HGF基因的表达,检测对鹿茸MSCs增殖、迁移及分化活动的影响和HGF/c-Met信号下游靶基因的表达变化。试验结果为揭示HGF/c-Met信号对鹿茸MSCs生物学功能和作用机制提供试验依据及理论基础。试验一,利用研究团队前期克隆得到的塔里木马鹿HGF基因c DNA全长序列,通过Premier5.0软件设计包含基因CDS区特异性引物,克隆获得2276bp序列,成功构建HGF过表达慢病毒载体,转染鹿茸MSCs后,HGF基因mRNA表达水平上调23倍,蛋白表达丰度升高1.5倍;同时设计HGF基因siRNA序列,筛选得到最佳siRNA,转染鹿茸MSCs后,HGF基因mRNA表达水平下调66%,蛋白表达丰度降低60%;试验通过CCK-8、Ed U检测了过表达和干扰组细胞的增殖能力,CCK-8试验显示过表达HGF组后体外培养48 h到96 h鹿茸MSCs的OD值显著增加（P<0.05）,而干扰HGF组该时间段的细胞OD值显著下降（P<0.05）;Ed U试验结果显示过表达HGF组的阳性细胞率极显著高于空载组及对照组（P<0.01）,而干扰HGF组显著低于空载组和对照组（P<0.05）,且检测该信号通路下游细胞增殖相关基因c-Met、RAS、ERK、MEK的mRNA表达量与上述试验结果呈相似结果。因此,HGF/c-Met信号对鹿茸MSCs的增殖活动起着促进作用。试验二,通过划痕试验与Transwell试验检测鹿茸MSCs迁移情况,过表达HGF基因后,划痕试验显示体外培养24h-72h细胞愈合百分比在各时间点均极显著高于空载组和对照组（P<0.01）;干扰HGF基因则呈相反结果（P<0.01）;Transwell试验结果显示过表达HGF基因穿过聚碳酸酯膜的细胞数极显著高于空载组和对照组（P<0.01）,而干扰HGF基因则呈现相反结果（P<0.01）。进而检测下游细胞迁移、存活活动相关基因Gab1、Grb2、AKT及PI3K的mRNA表达量与上述试验结果相符。因此认为,HGF/c-Met信号对鹿茸MSCs的迁移有促进作用。试验三,在鹿茸MSCs体外软骨诱导过程,尽管7d后细胞均有软骨分化的形态特征,其甲苯胺蓝染色结果显示过表达HGF基因与干扰HGF基因软骨细胞均分泌蛋白聚糖;但是RT-q PCR检测软骨细胞标志基因,过表达HGF基因后细胞的ColⅡ、Sox9及AGC的mRNA表达量极显著低于对照组（P<0.01）,而抑制HGF软骨标志基因的表达量显著高于对照组（P<0.01）。结果表明,HGF/c-Met信号在一定程度上抑制鹿茸MSCs的软骨分化活动。综上所述,过表达HGF通过HGF/c-Met信号通路上调c-Met、RAS、ERK、MEK基因促进鹿茸MSCs的增殖活动;上调Gab1、Grb2、AKT及PI3K基因而促进鹿茸MSCs的迁移活动,而干扰HGF通过HGF/c-Met信号通路下调相应基因从而抑制鹿茸MSCs的增殖和迁移活动。HGF/c-Met信号在一定程度上会抑制鹿茸MSCs的软骨分化。